刘 伟 , 刘德莉 , 陆峻泓 , 崔 磊 , 曹谊林(上海交通大学 医学院第九人民医院整复外科 上海市组织工程重点实验室 , 上海 200011)摘 要 : 目的 通过与疱疹性口腔炎病毒糖蛋白 G基因 (VSV2G)共转染 ,使含绿色荧光蛋白 (GFP)基因的逆转录病毒经超速离心得以浓缩 ,进一步提高 GFP逆转录病毒的细胞感染效率。
摘要:目的通过与疱疹性口腔炎病毒糖蛋白G基因(VSV2G)共转染,使含绿色荧光蛋白(GFP)基因的逆转录病毒经超速离 心得以浓缩,进一步提高GFP逆转录病毒的细胞感染效率。方法应用GFP2RV质粒转染PT67细胞,并用G418筛选出GFP阳 性克隆,利用其产生的病毒上清液再转染GP22293细胞,在G418筛选的同时,瞬时转染VSV2G基因。收集该...
VSV是一种包膜病毒,含有5种结构蛋白,其复制过程涉及从负链RNA合成正链RNA,再合成蛋白质和负链RNA组装成病毒粒子。VSV感染细胞时,其G糖蛋白诱导内吞作用帮助病毒侵入,病毒组装发生在细胞质膜上,形成的病毒粒子可以携带其他病毒的膜蛋白。通过替换G糖蛋白基因,可以构建报告基因(如GFP、RFP、萤光素酶...
目的构建并鉴定人Deltal和增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因双顺反子逆转录病毒表达载体。方法利用基因重组技术将人Deltal基因构建到含IRES-EGFP逆转录病毒载体中;电穿孔... 何飞,谭颖徽,杨峥嵘 - 《第三军医大学学报》 被引量: 28发表: 2005年 绿色荧光蛋白逆转录病毒载体的构建及其表达 目的实现绿色荧光蛋白(GFP)报...
目的建立一种含有基孔肯雅病毒(CHIKV)包膜蛋白的便于流行病学调查的疱疹性口炎病毒(VSV)假病毒.方法以缺失VSV G蛋白的VSV病毒做为载体,制备含有CHIKV膜蛋白的VSV-E2E1病毒.结果该VSV假病毒带有CHIKV膜蛋白,同时带有绿色荧光蛋白(GFP)或荧光素酶;功效性试验显示,VSV-E2E1病毒在CHIKV E2单克隆抗体1:2 000稀...
目的通过与疱疹性口腔炎病毒糖蛋白G基因(VSV-G)蛋白重组,提高含绿色荧光蛋白(GFP)基因逆转录病毒的感染效率,并使其经受超速离心以达到进一步浓缩.方法应用GFP-RV质粒转染PT67细胞并用G418筛选出GFP阳性克隆,利用其产生的病毒上清液再转染GP2-293细胞,在G418筛选的同时,瞬时转染VSV-G基因.收集该GP2-293细胞产生的重...
8.如权利要求6所述一种基于VSV载体的新型冠状病毒核酸诊断假病毒质控品及其制备方法的制备方法,其特征在于: 目的靶标基因与病毒载体的连接方法如下, 对目的靶标基因和病毒载体进行酶切, 然后采用重组技术将目的靶标基因正向或反向插入到病毒载体中GFP基因上游或下游的偶联克隆位点。
本发明构建了包含VSV(水疱性口炎病毒)病毒基因组、可携带外源基因,能恢复出重组VSV病毒的重组VSV病毒载体,还制备了具有复制功能及感染性,可在被感染的宿主细胞中增殖并表达基因组中所携带的外源基因的重组VSV病毒颗粒。本发明将上述病毒载体及重组病毒用于高效表达外源基因,所表达的外源基因产物可被纯化,或直接将...
二、三种病毒对比 小结:AAV在神经元标记方面表现出色;VSV标记胞体与近端纤维,时间延长导致细胞损伤;LV标记胞体,轴突纤维未见标记。三、表达特异性 AAV2/9-CaMKIIα-Tau-GFP带有兴奋性神经元特异性启动子,通过GFP标记感染细胞,免疫荧光显示病毒特异性标记神经元细胞。四、安全性评估 实验表明,AAV...
摘要: 目的通过与疱疹性口腔炎病毒糖蛋白G基因(VSV-G)蛋白重组,提高含绿色荧光蛋白(GFP)基因逆转录病毒的感染效率,并使其经受超速离心以达到进一步浓缩.方法应用GFP-RV质粒转染PT67细胞并用G418筛选出GFP阳性克隆,利用其产生的病毒上清液再转染GP2-293细胞,在G418筛选的同时,瞬时转染VSV-G基因... 查看全部>> ...