The plasmid pVSV-ΔG-GFP encodes the antigenomic-sense (or positive-sense) RNA of a replicaton-restricted recombinant vesicular stomatitis virus (rVSV) in which the glycoprotein (G) gene has been replaced with GFP. This plasmid is used together with pla
图2.在小鼠背侧海马注射VSV-GFP,72h后灌流取材,脊髓腰段有较多信号,表明海马顺向跨突触,将信息传向脊髓(Figure provided by Dr.Fuqiang Xu's lab of Center for Brain Science at WIPM) 病毒工具列表 产品货号 产品名称 携带外源基因 功能 V01001 VSV-EGFP EGFP 顺向跨多级,绿色标记 V01002 VSV-mCherry...
VSV的感染靶细胞时,其中的G糖蛋白诱导细胞发生内吞作用,帮助病毒侵入细胞。侵入细胞后,VSV的组装发生在质膜上,病毒粒子从细胞表面出芽,在出芽时VSV获得一个包膜,该包膜包含源自质膜的脂质双层和G糖蛋白三聚体的刺突蛋白。 在这种情况下,VSV糖蛋白G的基因被替换为报告基因,例如GFP、RFP等荧光蛋白、萤光素酶或...
摘要:目的通过与疱疹性口腔炎病毒糖蛋白G基因(VSV2G)共转染,使含绿色荧光蛋白(GFP)基因的逆转录病毒经超速离 心得以浓缩,进一步提高GFP逆转录病毒的细胞感染效率。方法应用GFP2RV质粒转染PT67细胞,并用G418筛选出GFP阳 性克隆,利用其产生的病毒上清液再转染GP22293细胞,在G418筛选的同时,瞬时转染VSV2G基因。收集该...
刘 伟 , 刘德莉 , 陆峻泓 , 崔 磊 , 曹谊林(上海交通大学 医学院第九人民医院整复外科 上海市组织工程重点实验室 , 上海 200011)摘 要 : 目的 通过与疱疹性口腔炎病毒糖蛋白 G基因 (VSV2G)共转染 ,使含绿色荧光蛋白 (GFP)基因的逆转录病毒经超速离心得以浓缩 ,进一步提高 GFP逆转录病毒的细胞感染效率。
图3. 在小鼠背侧海马注射VSV-GFP,72h后灌流取材,脊髓腰段有较多信号,表明海马顺向跨突触将信息传向脊髓(BrainVTA) 图4. rVSV的顺行或逆行跨多突触案例(Mundell NA et al.2015) 参考文献 [1] van den Pol AN, Ozduman K, Wollmann G,et al. Viral strategies for studying the brain, including a re...
用浓缩前后含GFP基因假病毒液分别转染NIH 3T3细胞,GFP阳性表达率可由44.21%升高至79.80%;转染兔软骨细胞和成纤维细胞,猪骨髓基质干细胞和脂肪干细胞后,均可见GFP阳性表达明显增强.结论 逆转录病毒与VSV-G共转染GP2-293包装细胞可以制备出高滴度的假病毒液.浓缩病毒液的高转染率为其在组织工程种子细胞标记方面的广泛...
目的通过与疱疹性口腔炎病毒糖蛋白G基因(VSV-G)蛋白重组,提高含绿色荧光蛋白(GFP)基因逆转录病毒的感染效率,并使其经受超速离心以达到进一步浓缩.方法应用GFP-RV质粒转染PT67细胞并用G418筛选出GFP阳性克隆,利用其产生的病毒上清液再转染GP2-293细胞,在G418筛选的同时,瞬时转染VSV-G基因.收集该GP2-293细胞产生的重...
VSV是一种包膜病毒，含有5种结构蛋白，其复制过程涉及从负链RNA合成正链RNA，再合成蛋白质和负链RNA组装成病毒粒子。VSV感染细胞时，其G糖蛋白诱导内吞作用帮助病毒侵入，病毒组装发生在细胞质膜上，形成的病毒粒子可以携带其他病毒的膜蛋白。通过替换G糖蛋白基因，可以构建报告基因（如GFP、RFP、萤光素酶...
标记基因包括例如编码绿色荧光蛋白(以下称为“GFP”)、β-半乳糖苷酶和萤光素酶等的基因,特别优选编码GFP的基因。 本发明的假型化病毒载体可以被基本上纯化。纯化可以通过过滤器过滤、离心分离和柱提纯等公知的纯化、分离方法进行。例如,将载体溶液用0.45μm的过滤器过滤后,在42500×g、4℃的条件下离心90分钟,...