UDG酶也称为UNG酶,可有效预防PCR扩增产物造成的气溶胶污染。它能够选择性水解断裂含有dU的双链或单链DNA中的尿嘧啶糖苷键,形成有缺失碱基的DNA链,该缺失碱基的DNA链在碱性介质以及高温下会进一步水解断裂成为单链核苷酸。 UDG酶的专一性和作用原理 由于UDG酶底物专一性,在PCR体系中使用dUTP能够有效区分PCR产物和模板...
高品质的UNG酶可以消除高达108的U-DNA产物,和热启动 Taq酶一同用于建立含 有 UNG/dUTP 防污染体系的热启动 PCR 反应系统。UNG 酶特征? 克隆有 Ecoli K12 Uracil-N-Glycosylase 基因的大肠杆菌经诱导表达后, 再经三次过柱 纯化分离出来 3、的重组蛋白。分子量 25.66 KDa。?反应条件: 50 C , 2 分钟;反应 ...
(一)标本间交叉污染:标本污染主要有收集标本的容器被污染,或标本放置时,由于密封不严溢于容器外,或容器 外粘有标本而造成相互间交叉污染;标本核酸模板在提取过程中,由于吸样枪污染导致标本间污染;有些微生物标本尤其是病毒可随气溶胶或形成气溶胶而扩散,导 致彼此间的污染.(二)PCR 试剂的污染:主要是由于在PCR ...
常用的措施是使用UNG酶(Uracil-N-Glycosylase)和Taq酶热启动。PCR反应最常见, 最重要的污染物是PCR产物,防污染热启动PCR试剂盒以dUTP取代dTTP,所以PCR产物都是含有dU的DNA链。在PCR开始前增加50℃的保温步骤,UNG酶即可将反应体系中已有的U-DNA污染物中的尿嘧啶碱基降解,并在随后变性这步的条件下DNA链断裂,消除...
UNG酶对RNA无活性,主要应用于PCR扩增产物的防污染。如果在PCR反应中以dUTP替代dTTP掺入DNA中,形成了含dU碱基的PCR扩增产物,该酶能选择性断裂单链和双链DNA中U碱基的糖苷键,降解该PCR扩增产物。37℃条件下,1小时降解1μg含dU碱基的单链DNA的酶量为1单位。 组分 规格 UNG酶(1U/μL) 200μL 说明书 1份...
UNG酶在PCR中的作用.doc,UNG酶在PCR中的作用 产物,和热启动Taq酶一同用于建立含有UNG/dUTP防污染体系的热启动PCR反应系统。 UNG酶特征 ? 克隆有Ecoli K12 Uracil-N-Glycosylase 基因的大肠杆菌经诱导表达后,再经三次过柱纯化分离出来的重组蛋白。分子量25.66 KDa。 ? 反应
假如发生气溶胶污染或残留污染,由于扩增反应体系中含有UDG酶,它会首先将这些扩增产物降解,避免它们作为模板进行扩增反应,产生假阳结果。 模板DNA template:含 dUTP的扩增产物,稀释10倍后,取2µl作为模板,进行LAMP反应。 UDG酶可以有效的降解含dUTP的扩增产物,从而避免扩增产物污染导致的假阳性结果。 更多详细内容: ...
尿嘧啶DNA糖苷酶(UNG酶)产品介绍尿嘧啶DNA糖苷酶(UNG、UDG)来源于大肠杆菌重组克隆表达,分子量为25kDa,可催化含尿嘧啶的单链和双链DNA释放游离尿嘧啶。UNG酶对RNA无活性,主要应用于PCR扩增产物的防污染。 其作用原理基于:如果在PCR反应中以dUTP替代dTTP掺入DNA中,形成了含dU碱基的PCR扩增产物,该酶能选择性断裂单...
防污染qPCR MasterMix(含UNG酶)广泛应用于DNA和cDNA的相对定量检测。由于PCR对核酸的扩增效率极高,在PCR实验中,非常容易造成移液器、台面、PCR仪、空气等气溶胶污染。当实验环境被污染后,会导致阴性样本的假阳性结果。在该Probe qPCR Mix中,将dNTP中的dTTP全部更换为dUTP,从而使得扩增后的PCR产物中包含dU碱基。在...