UDG酶的专一性和作用原理 由于UDG酶底物专一性,在PCR体系中使用dUTP能够有效区分PCR产物和模板,使UDG仅降解PCR产物而不对模板DNA产生影响。因此UDG/dUTP系统能够有效预防PCR扩增产物造成的气溶胶污染,因此是被广泛应用于定量PCR检测试剂盒的关键酶原料。 比如擎科生物TSE203 2×TSINGKE®Master qPCR Mix(SYBR Green I...
UNG酶(尿嘧啶DNA糖基化酶)-dUTP 英文名称: 总访问: 3248 国产/进口: 国产 半年访问: 18 产地/品牌: 上海闪晶分子生物 产品类别: 分子生物学试剂 规格: 最后更新: 2025-1-9 货号: CAS 号: 参考报价: 立即询价 电话咨询 [发表评论] [本类其他产品] [本类其他供应商] [收藏] 分享:微信新浪...
2. dUTP法:用dUTP代替dTTP,使产物中掺入大量 dU。在再次进行 PCR扩增前,用UNG 处理PCR混合液即可消除 PCR产物的残留污染。由于UNG在PCR循环中的变性一步便可 被灭活,因此不会影响含 dU的新的PCR产物。3. dU引物法:合成引物时以 dU代dT,这样PCR产物中仅5 /端带dU。UNG处理后,引物失去了结合位点而不能...
PCR反应： 执行PCR反应，包括支原体DNA和引物，以扩增目标DNA。在PCR反应中，通常会添加dUTP（脱氧尿嘧啶三磷酸）代替常规的dATP。这样，扩增得到的DNA链中包含尿嘧啶，而不是腺嘧啶。Ung酶处理： 在PCR反应后，加入Ung酶。Ung酶能够识别和切除PCR产物中的尿嘧啶，形成AP位点（腺苷酸（A）和磷酸（P）的残基）。
如果在 PCR 反应体系中以 dUTP 取代 dTTP,使 PCR 产物都是含有dU的DNA链,在 PCR 开始前增加50 ℃的保温步骤 ,UNG 酶即可将反应体系中已有的dU的DNA污染物中的尿嘧啶碱基降解,并在随后变性这步的条件下 DNA 链断裂,消除由于污染DNA产生的扩增,从而保证扩增结果的特异性,准确性。同时 UNG 酶被灭活,不会再...
UNG对不含dU的模板无任何影响。UNG可从单或双链DNA中消除尿嘧啶，而对RNA中的尿嘧啶和单一尿 嘧啶分子则无任何作用。2. dUTP法：用dUTP代替dTTP，使产物中掺入大量dU。在再次进行PCR扩增前，用UNG处理PCR混合液即可消除PCR产物的残留污染。由于UNG在PCR循环中的变性一步便可被灭活，因此不会影响含dU的新的...
PCR反应:执行PCR反应,包括支原体DNA和引物,以扩增目标DNA。在PCR反应中,通常会添加dUTP(脱氧尿嘧啶三磷酸)代替常规的dATP。这样,扩增得到的DNA链中包含尿嘧啶,而不是腺嘧啶。 Ung酶处理:在PCR反应后,加入Ung酶。Ung酶能够识别和切除PCR产物中的尿嘧啶,形成AP位点(腺苷酸(A)和磷酸(P)的残基)。这个步骤有助于防...
进行LAMP或PCR扩增反应时,将dNTP mix 换成含dUTP的mix,得到的扩增产物是含有dU的dsDNA. 假如发生气溶胶污染或残留污染,由于扩增反应体系中含有UDG酶,它会首先将这些扩增产物降解,避免它们作为模板进行扩增反应,产生假阳结果。 模板DNA template:含 dUTP的扩增产物,稀释10倍后,取2µl作为模板,进行LAMP反应。 UDG...
UNG酶(Uracil-N-Glycosylase)的作用原理是选择性水解断裂含有dUTP的双链或单链DNA中的尿嘧啶糖苷键,形成的有缺失碱基的DNA链,在碱性介质以及高温下会进一步水解断裂,从而被消除;UNG酶的最佳活性温度为50℃,在95℃会被灭活。 由于普通的Taq酶即使在室温下也有一定的活性,如果不采取措施,在加入PCR试剂的过程中、正式...