【目的】鉴定及克隆新型隐球酵母(Cryptococcus neoformans)中PolⅢ型的U6启动子(CnU6启动子),并验证CnU6启动子能否有效转录shRNA及CRISPR/Cas9系统中gRNA.【方法】结合GenBank数据库已公布的新型隐球酵母基因组信息和本实验室RNA-seq文库数据,利用生物信息学技术分析得到新型隐球酵母中具有高转录水平的U6RNA序列.使...
专利名称:一种橡胶树U6基因启动子proHbU6.8及其克隆与应用 专利类型:发明专利 发明人:辛士超,杨先锋,范月婷,戴雪梅,华玉伟,黄华孙,王春,王克剑 申请号:CN201910466630.0 申请日:20190531 公开号:CN110157709A 公开日:20190823 专利内容由知识产权出版社提供 摘要:本发明属于基因工程技术领域,具体涉及一种...
目的 构建有hTERT/U6嵌合启动子的小干扰RNA(small interfere RNA,siRNA)表达载体,并用分子生物学的技术和方法验证其对肝癌细胞SMMC-7721的效应.方法 构建siRNA-EGFP-PTZU6+1表达载体,将其转染到稳定表达EGFP的肝癌细胞株7721(EGFP-7721),观察细胞荧光的变化及 RT-PCR,Western blot筛选出更有效的siRNA-EGFP-FIEU6+...
合成引物,引物通过退火形成二聚体;将二聚体通过酶切位点bsmbi连接到含有gmu3-19g-1启动子或gmu6-16g-1启动子序列的骨架载体上;含有gmu3-19g-1启动子的骨架载体pu3-sgr中u3pro-sgrna核苷酸序列如seqidno.3所示;含有gmu6-16g-1启动子序列的骨架载中gmu6pro-grna序列如seqidno.4所示;...