【结果】苹果基因组中共检索到6条U6 snRNA(E-value<3e -40),分别位于第6、7、9、10、15和17号染色体上,取5′端27 bp snRNA及其上游1 500 bp作为候选U6启动子。序列比对结果显示,苹果U6启动子与拟南芥相同,均具有两个保守的元件,包括上游序列元件(Upstream sequence element,USE)和TATA-Like box。瞬时转化后...
常用的包括RNA聚合酶Ⅲ类启动子,如人源或小鼠U6启动子和人源的H1 RNA启动子,这类启动子相对简单,完全位于转录序列上游,转录产物不含有来自启动子的序列,转录产量相对较高,遇到3-6个连续的T就会终止转录,不需转录终止信号,适合制备端的RNAs。 shRNA的表达量取决于启动子的强弱,U6启动子比...
每个启动子的基因枪转化重复 3 次,最后根据 染色深浅筛选出在棉花生殖细胞中高效转录的GbU6启动子。【结果】经两轮PCR扩增后获得5种GbU6启动子,启 动子长度分别为 1 166、1 119、1 134、1 214 和 1 176 bp,并构建获得了相应的 5 种 CRISPR/Cas9 基因组编辑 载体;对拟南芥和克隆的5个GbU6启动子序列进行...
苹果u6启动子的克隆及功能分析
用RT—PCR检测U6启动子的转录活性,并测定培养细胞的生长曲线.结果hU6 snRNA基因启动子和紧接转录起始点hU6 snRNA的前27个核苷酸被成功地克隆入PUC19质粒载体,重组载体在SGC-7901细胞中能高表达小分子RNA,并且未观察到后者对细胞体外增殖的影响.结论成功构建了以hU6 snRNA启动子驱动的,能在人胃低分化腺癌SGC-7901...
1、为解决上述技术问题,本发明提出一种飞蝗u6启动子、构建飞蝗突变体方法和应用。 2、本发明的技术方案是这样实现的: 3、一种飞蝗u6启动子,所述飞蝗u6启动子具有tata box。 4、所述飞蝗u6启动子的核苷酸序列如seq id no.1所示。 5、利用上述的飞蝗u6启动子构建飞蝗突变体方法,其特征在于,步骤为: ...
‘金冠’苹果基因组中存在多条 U6 snRNA,本研究选择 E-value<3e -40 的 6 条 U6 snRNA,取其转录起始位点上游 1 500 bp 外加 27 bp snRNA 序列作为候选 U6 启动子进行比对分析。而后设计引物克隆并构建 U6 启动子驱动萤火虫荧光素酶基因(Firefly luciferase,LUC)的融合表达载体,利用农杆菌介导的瞬时转化法...
1.启动子,其特征在于,所述启动子的核酸序列如seq id no:8所示。 2.基因表达盒,其特征在于,所述表达盒含有权利要求1所述的启动子。 3.表达载体,其特征在于,所述表达载体含有权利要求2所述的表达盒。 4.宿主细胞,其特征在于,所述宿主细胞含有权利要求3所述的表达载体。
1、针对上述现有技术,本发明的目的在于提供5个扁蓿豆u6启动子,并进一步公开其克隆方法和应用,本发明的另一目的在于提供扁蓿豆u6启动子基因在转基因技术领域中的应用。本发明通过pcr及农杆菌侵染烟草叶片瞬时转化的方法克隆并筛选高转录活性的扁蓿豆u6启动子,对于构建扁蓿豆crispr/cas9基因编辑系统,实现扁蓿豆的分子...
u6启动子是序列较短(251bp),没有物种特异性的启动子,在大鼠、小鼠或其他哺乳动物细胞中均可以工作,是一种理想的病毒载体用启动子。一般认为u6启动子是rna聚合酶iii依赖的启动子,虽然其也具有rna聚合酶ii依赖的启动子活性,但是很弱,所以科研人员通常不利用其rna聚合酶ii依赖的启动子活性,在实践中,u6启动子用于编码...