Tunel染色 Tunel染色即原位末端转移酶标记技术。凋亡细胞的DNA双链断裂或一条链出现缺口,产生一系列3’-OH末端,在脱氧核糖核苷酸末端转移酶(TdT)作用下,将脱氧核糖核苷酸和生物素所形成的衍生物标记到DNA的3′末端,从而进行凋亡细胞的检测。TUNLE染色是分子生物学与形态学相结合的研究方法, ...
【优点】:TUNEL染色具有较高的敏感性和特异性,能够检测到单个凋亡细胞,因此在研究细胞凋亡的过程中非常有用。 【局限性】:尽管TUNEL染色被广泛用于检测细胞凋亡,但它并不能区分凋亡和其他形式的细胞死亡,如坏死。此外,一些非凋亡的细胞过程也可能导致DNA断裂,从而产生TUNEL阳性信号。因此,在使用TUNEL染色时,需要结合其...
通过检测DNA断裂末端的3'-OH基团,Tunel染色可以准确地识别凋亡细胞,并在细胞核内形成明亮的荧光信号。本文将详细介绍Tunel染色的原理,包括染色步骤、染色反应的机理、染色结果的解读以及其在研究中的应用。 正文内容: 1. Tunel染色的步骤 1.1细胞固定和透化 1.2凋亡诱导 1.3染色反应 1.4洗涤和封片 1.5观察和分析 2....
TUNEL染色时间过长，可能导致背景着色增强，建议控制在37°C孵育60分钟内，并根据凋亡程度适当延长。未充分清洗样本，染色后应增加PBS清洗次数至5次，以减少非特异性染色。问题三：荧光背景强可能原因及解决方法：TUNEL染色时间过长，建议控制在适当范围内。TUNEL染色液浓度过大，应增大稀释倍数以优化浓度。PBS清洗不充分...
客户在线下单——订单/实验材料确认——样本制备（可选）——切片（仅限石蜡切片与冰冻切片）——TUNEL染色（可选荧光标记或生物素标记）——可选荧光显微镜拍照或后续DAB染色拍照——凋亡指数分析——出具实验报告——结果交付 服务内容及说明 适用场景 1.检测外界刺激对植物细胞的影响；2.检测不同阶段植物细胞的变化...
基因组DNA断裂时,暴露的3’-OH可以在末端脱氧核苷酸转移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT) 的催化下加上荧光素 (FITC) 标记的dUTP (fluorescein-dUTP) ,从而可以通过荧光显微镜或流式细胞仪进行检测,这就是TUNEL (TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling) 法
(1)贴壁细胞的TUNEL染色 1)取待测的细胞爬片,用新鲜配制的×1PBS清洗,室温,3分钟×3次。 2)用4%多聚甲醛固定,室温,25分钟。 3)用新鲜配制的×1PBS清洗,室温,5分钟×2次。 4)细胞爬片浸入0.2%TritonX-100(×1PBS配制)溶液中,室温,5分钟。
QTUNEL染色时间过长。A建议染色时间适当，一般是 37 ºC 孵育60 min。QPBS漂洗不足。A酶或者荧光标记工作液反应完后PBS漂洗不足，会导致残留。如果背景较高，可增加漂洗次数，清洗不彻底会导致切片的非特异性着色。Q曝光时间过长。A调整曝光条件，先对阴性组调整到无背景光，然后用相同的曝光条件拍摄实验组。以...
凋亡细胞的TUNEL染色已在科学研究中广泛应用。由于TUNEL染色的步骤多,操作精细,影响DNA断裂的因素多,实验结果往往不够准确致使实验失败。 总结多年实验经验,下文将从组织的取材方式、取材大小、固定剂选择、组织离体后缺血时间、组织在固定剂内的固定时间以及实验操作中的诸多细节等方面进行讲解TUNEL染色实验。