在进行TUNEL染色之前,样本的预处理是至关重要的。首先,将组织切片或细胞培养样本用PBS(磷酸盐缓冲液)洗涤三次,每次5分钟,以去除残留的培养基或杂质。接着,使用4%的多聚甲醛固定样本,固定时间通常为10-30分钟,以保持细胞结构的完整性。固定后,再次用PBS洗涤样本,然后进行渗透化处理,通常使用0.1% Triton X-100或0.1
以下是TUNEL染色的步骤：准备工作：1.去离子水：除去离子，避免离子干扰反应。2. 去氧核酸酶（DNase）的酶标：新鲜制备，如购买的DNase酶标已开封或保存时间较长，需要用氧化热焓（将无水乙酸用过氧化氢气化后灭菌）处理一晚才可以使用。步骤一：样本固定 1.取细胞或组织样本，放入离子缺失的缓冲液中，使其完全被...
TUNEL染色法是一种常用的检测细胞凋亡的方法,主要利用TdT(末端脱氧核苷酸转移酶)催化给DNA的3'-OH基团加上标记物(如地高辛、生物素等)标记的dUTP,然后与辣根过氧化物酶(HRP)标记的Streptavidin(链霉亲和素-HRP)结合,通过DAB显色来显示凋亡细胞。以下是详细的操作步骤:1️⃣ 用1×PBS稀释Streptavidin-HRP(1:500...
TUNEL 反应液是细胞 Tunnel 染色的核心。一般来说,TUNEL 反应液包含 Terminal deoxynucleotidyl transferase (TdT) 酶和标记有荧光或酶的 dUTP。根据实验需求,可以选择不同的标记物,如荧光染料 FITC、Rhodamine 或者酶标记物如辣根过氧化物酶(HRP)。 4. 进行 TUNEL 反应 将TUNEL 反应液加到透化后的细胞上,尽量覆盖...
进行TUNEL染色的具体步骤如下：首先，将石蜡切片置于蒸馏水中脱蜡。然后，用PBS清洗样本三次，每次5分钟。接着，将样本置于37℃的蛋白酶K溶液中处理30分钟，再次用PBS清洗三次。用H2O2处理10分钟，再清洗三次。在避光条件下，进行TdT酶反应60分钟。之后，继续用PBS清洗三次，以去除未结合的标记物。添加...
最后，完成全景扫描，捕捉每一个细节，服务周期内，包括蜡块、玻片和扫描图像将在1-2个工作日内交付。全程服务保障:</ 从取材包埋到切片制片，再到TUNEL染色，全程由专业人员操作，确保每一步都精确无误。全景扫描（明场）和HALO分析服务将为您提供详尽的数据解读，帮助您迅速掌握分析结果。
具体步骤如下: 1. 配置染色策略:根据染色规则,配置相应的染色策略。染色策略可以是基于ACL(访问控制列表)、路由映射、QoS(服务质量)等。 2. 应用染色策略:将配置好的染色策略应用到Tunnel上。这样,Tunnel就会根据染色策略对经过它的数据包进行染色。 3. 检查染色结果:通过查看染色结果,验证染色是否成功。可以通过...
TUNEL染色是检测细胞凋亡染色的常见方法,其原理是细胞在发生凋亡时,会激活一些DNA内切酶,这些内切酶会切断核小体间的基因组DNA。细胞凋亡时抽提DNA进行电泳检测,可以发现180~200bp的DNA ladder。基因组DNA断裂时,暴露的3'-OH可以在末端脱氧核苷酸转移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT)的催化下加上荧光素、...
Tunel染色步骤Tunel 准备阴参和阳参细胞 1: enzyme solution 2: label solution 10个样本,50ulTUNEL reaction mixture(现用现配,冰上) per sample and 2 negative controls by using 50ul Label Solution per control. 配TUNEL reaction mixture: 1.吸出100ullabel solution作为阴参用(阴参每孔50ullabel solution...
大家好,这一期小编来带大家了解一下TUNEL检测细胞凋亡实验——分析实验中TUNEL染色结果失败的原因。首先要先了解一下TUNEL染色步骤,如下图所示。 图1. TUNEL染色操作步骤(注:细胞核染色步骤可选) 用TUNEL试剂盒检测细胞凋亡过程中,需要用到蛋白酶K、荧光素-dUTP、TdT酶等各种试剂。除此以外,还要设置阳性和阴性对照...