用蛋白质合成抑制剂CHX处理细胞,可阻断TNF诱导的抗凋亡蛋白上调,导致细胞从存活状态转向凋亡;如果进一步用凋亡抑制剂阻止凋亡发生,细胞则会进入程序性坏死。在正常情况下,机体中的大部分细胞类型在TNF的作用下不会发生细胞死亡,只有小肠上皮等细胞类型对TNF比较敏感,但目前决定细胞敏感性的因素并不十分清楚,TNF诱导细胞死...
为了确定TRIF和CD14是否对TNF诱导的其它细胞死亡方式是否发挥作用,用hTNF在环己胺(CHX)或SMAC模拟物(SMAC)和泛肝素酶抑制剂zVAD的存在下处理BMDMs,分别驱动细胞凋亡或坏死。缺少TRIF和/或CD14,而不是TLR3和/或TLR4,提供了对TNF诱导的细胞凋亡和坏死的保护,表明这些蛋白的作用超出了由hTNF/5z7诱导的caspase-8介导的...
目的 探讨Legumain(LGMN)对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和放线菌酮(CHX)共同诱导的细胞凋亡的抑制作用,为进一步研究Legumain在肿瘤细胞生长增殖的分子机制以及相关的肿瘤治疗提供实验基础和理论依据.方法 采用Western Blot和水解多肽发色底物法分别测定人胚胎肾(HEK)293细胞株和小鼠成纤维细胞L929细胞株中的Legumain表达量,细...
在进一步扩展我们对 TRIF 在 TNF 反应中的作用的研究之前,并确保我 TRIF 依赖表型不是由于重组 TNF 的内毒素污染或 TRIF 和 CD14 缺陷的 BMDMs 中 TNF-R1 水平的差异。 为了确定 TRIF 和 CD14 是否对其他 TNF 诱导的细胞死亡模式很重要,作者在放线菌酮 (CHX) 或 SMAC 模拟物 (SMAC) 和泛半胱天冬酶抑制...
在存在CHX的情况下，USP20在HeLa细胞中的过表达显着增加了p62蛋白的半衰期，但USP20-CI的过表达没有。此外，与对照HeLa细胞相比，去除USP20的HeLa细胞中p62蛋白的半衰期显着缩短，基础水平p62的稳定性也受到影响。因此，这些结果表明USP20稳定了p62蛋白。接下来，作者研究了USP20去泛素化p62的哪种多泛素化模式。作者...
In apoptosis, proteolysis by caspases is the primary mechanism for both initiation and execution of programmed cell death (PCD). In contrast, the impact of proteolysis on the regulation and execution of caspase-independent forms of PCD (programmed necros
Ca9-22 cells were preincubated with wortmannin (Wort, 300 nM) for 3 h or with actinomycin D (Act D, 1 μg/ml ), cycloheximide (CHX, 1 μg/ml), an NF-κB inhibitor (PDTC, 5 μM) and MAP kinase inhibitors, including a p38 inhibitor (SB203580, 5 μM) (indicated as “SB”),...
TNF+CHX-induced MEF cell death is caspase independent, since zVAD or QVD cannot inhibit it (Figure 1A). Both zVAD and QVD can partially inhibit TNF+CHX-induced cell death in RIP3−/− MEFs (Figure 1A and 1B). Similar results were obtained when immortalized MEFs were used (Supple- ...
CHX: cycloheximide cIAP1: cellular inhibitor of apoptosis protein CYLD: cylindromatosis FADD: Fas-associated protein via a death domain FRET: Förster Resonance Energy Transfer HOIP: HOIL-1-interacting protein HOIL-1: heme-oxidized iron regulatory protein 2 ubiquitin ligase-1 ...
经环己亚胺(CHX)处理后,TNFAIP2敲低组NRF2降解更快(图3j),表明TNFAIP2抑制NRF2蛋白降解,但不促进其合成。随后,我们发现当TNFAIP2被敲低时,蛋白酶体抑制剂MG132或类泛素化修饰抑制剂MLN4924可阻断NRF2的降解(图3k)。此外,免疫共沉淀(Co-IP)实验显示,当TNFAIP2被敲除时,泛素结合的NRF2增加,这可以通过TNFAIP2...