转座酶(Transposase,TNP) Tnp序列全长477个氨基酸。Tnp含有三个结构域:N末端、包含活性位点的催化结构域和C末端。 1、N末端(黄色):包含70个氨基酸,组成许多α螺旋和β-转角用于DNA binding; 2、Tnp活性中心(绿色):位于中间300个氨基酸,包含一个“核糖核酸酶H样基序”、一个混有β片层结构的α/β/α折叠结构;...
CUT&Tag技术的核心原料酶是Hyperactive PA/PG-Tn5 Transposase,它具有高活性,对微量DNA有高灵敏度和高亲和力,能有效抓取数十个细胞中的有限结合位点等特点。 Hyperactive PA/PG-Tn5 Transposase结构 Hyperactive PA/PG-Tn5 Transposase的N端结构域为金黄色葡萄球菌A蛋白(Protein A) 的一部分或链球菌G蛋白(Protein G)...
因此,建立一个有效的可以用于植物转录因子-DNA互作的改进版CUT&Tag方法用于植物特别是作物的ENCODE研究,具有极重要的价值。 研究团队利用生物素修饰的接头进行转座酶(pA/G-Tn5)的包埋,形成带生物素标记的转座子介导靶基因位点的切割及...
Tn5 Transposase, a member of the RNase superfamily, is utilized in ATAC-seq to analyze "open" DNA chromatin regions. This highly active mutant inserts sequencing adapters into open chromatin regions, enhancing efficiency compared to natural enzyme levels. During "tagmentation." Tn5 cuts double-strand...
图1. NGS™ Tn5 Transposase的工作原理图。 产品用途: 二代测序(NGS)文库构建时的片段化和加接头; 将测序引物引入克隆DNA或质粒; 细菌基因敲除库的建立; 新型细菌菌株工程改造; 目的基因的插入失活; 将T7转录启动子、抗性标记等插入靶DNA等。 使用说明: ...
UT&Tag(Cleavage Under Targets and Tagmentation)是蛋白-DNA互作的一大革新技术,它不需要使用甲醛交联以及免疫共沉淀,而是通过针对靶蛋白(如转录因子、染色质重塑蛋白)的抗体和Protein A/G的介导,使得与Protein A/G融合的Tn5酶(Tagmentase)在切割DNA片段的同时在序列两端加上测序接头,经PCR扩增后即可形成用于高通量测...
碧云天生产的BeyoNGS™ pG-Tn5 Transposase,中文名为BeyoNGS™ pG-Tn5转座酶,是一种来源于E.coli,经过改造的具有极高活性Tn5转座酶突变体和Protein G的融合蛋白。pG-Tn5转座酶在和适当测序接头(Adapters)组装后成为pG-Tn5 Transposome (pG-Tn5转座体),可用于CUT&Tag实验。 CUT&Tag (Cleavage Under Targets ...
Protein A 偶联转座酶(Protein A-Tn5) , 即通过将Protein A与改造的超高活性Tn5转座酶融合,形成兼具双重活性的新型融合酶(pA-Tn5Transposase),可在抗体引导下精准靶向切割目的蛋白附近的DNA序列,适用于CUT&Tag(Cleavage Under Targets and Tagmentation)技术。CUT&Tag是替换传统的ChIP-Seq用以研究蛋白质-基因组互作的...
碧云天生产的BeyoNGS™ pG-Tn5 Transposase,中文名为BeyoNGS™ pG-Tn5转座酶,是一种来源于E.coli,经过改造的具有极高活性Tn5转座酶突变体和Protein G的融合蛋白。pG-Tn5转座酶在和适当测序接头(Adapters)组装后成为pG-Tn5 Transposome (pG-Tn5转座体),可用于CUT&Tag实验。
[7] Picelli S, Björklund A K, Reinius B, et al. Tn5 transposase and tagmentation procedures for massively scaled sequencing projects [J]. Genome research, 2014, 24(12): 2033-40. [8] Di L, Fu Y, Sun Y, et al. RNA sequencing by direct tagmentation of RNA/DNA hybrids [J]. Proc...