*有DMF的Tagmentation buffer可以不另加PEG8000,但也可以加8%-9%的PEG8000 *当DNA Input低至pg级别时,就有必要另加PEG8000以替代DMF ③ 5×TAPS-DMF buffer[7] *如果Tagmentation效果不好,可另加PEG8000 3. 反应温度及最佳反应时间 Tn5 酶Tagmentation过程中,反应温度与反应时间的控制非常重要,不同实验,不同D...
制备好Tn5转座体可直接用于DNA片段化实验,也可以-20℃保存。 d.片段化(Tagmentation)效果测试。 按照下表配制反应体系,轻轻吹打混匀后,55℃孵育5-10分钟。随后加入5μl Stop Buffer (5X),混匀后55℃孵育5分钟终止反应,片段化的产物可用于检测或纯化后建库, 效果参考图3。根据打断片段的大小调整复合体用量,如果...
pA-Tn5 Transposase (10 U/μL, without buffer) 1 mL 20 mL 50 mL 【注】:5×Tagment Buffer L含Mg2+,用于测试制备的转座子片段化DNA的效果,而非CUT&Tag工作Buffer。 产品应用 高通量建库;CUT&Tag; 运输与保存方法 干冰运输。-85~-65℃保存,有效期1年。
改变片段化反应的buffer：原来是Tris，但是它会随着温度的升高降低pH，不稳定 作者用的新buffer叫做TAPS:同时，把转座反应体系由50ul降低到了20ul，转座后DNA的纯化也由原来的柱回收改成了直接用SDS和ddH2O 把Tn5从DNA上剥离下来。在在同一个管中实现tagmentation和PCR，不仅步骤简便，而且通量也提高了 ...
b. 5 × Tagment Buffer L含Mg2+,用于测试制备的转座子片段化DNA的效果,而非CUT&Tag工作Buffer。 整个试剂盒于-85 ~ -65℃保存,干冰运输;收到货后Hyperactive®pG-Tn5 Transposase于-85 ~ -65℃保存,其余组分可于-30 ~ -15℃保存;生成的转座子于-30 ~ -15℃保存,有效期一年。
10×TPS 缓冲液100μl 100μl×5 Buffer 组分:1)贮存溶液：50 mM Tris-HCl (pH 8.0 @ 25 °C)，100 mM NaCl，0.1 mM EDTA，0.1% Triton X-100和50%甘油(V/V)。2)反应缓冲液：（随酶提供）5× LM 缓冲液 3)10×TPS 缓冲液：100mM Tris, pH7.5-8.0, 500mM NaCl.储存温度:储存于-20...
For a typical reaction, 2 μl (approximately 0.2 μg of protein/μl) of Tnp was added to 18 μl of pRZTL1 plasmid (approximately 1 μg of DNA) in the transposition reaction buffer (0.1 m potassium glutamate, 25 mm Tris acetate, pH 7.5, 10 mm Mg2+acetate, 50 μg/ml bovine serum...
d.片段化(Tagmentation)效果测试。 按照下表配制反应体系,轻轻吹打混匀后,55℃孵育5-10分钟。随后加入5μl Stop Buffer (5X),混匀后55℃孵育5分钟终止反应,片段化的产物可用于检测或纯化后建库, 效果参考图3。根据打断片段的大小调整复合体用量,如果片段过长,增加转座体的使用量;如果片段过短,则减少转座体的使...
*有DMF的Tagmentation buffer可以不另加PEG8000,但也可以加8%-9%的PEG8000 *当DNA Input低至pg级别时,就有必要另加PEG8000以替代DMF ③ 5×TAPS-DMF buffer[7] *如果Tagmentation效果不好,可另加PEG8000 3. 反应温度及最佳反应时间 Tn5 酶Tagmentation过程中,反应温度与反应时间的控制非常重要,不同实验,不同...
Protein A 偶联转座酶(Protein A-Tn5) , 即通过将Protein A与改造的超高活性Tn5转座酶融合,形成兼具双重活性的新型融合酶(pA-Tn5Transposase),可在抗体引导下精准靶向切割目的蛋白附近的DNA序列,适用于CUT&Tag(Cleavage Under Targets and Tagmentation)技术。CUT&Tag是替换传统的ChIP-Seq用以研究蛋白质-基因组互作...