Fig3. Tmem119-CreERT2小鼠在小胶质细胞中具有高效的重组效率。 Tmem119-CreERT2小鼠的构建 我们利用CRISPR/Cas9技术在Tmem119基因的终止密码子前插入了2A-CreERT2基因盒,使得Cre重组酶具有Tmem119启动子特异性,且需要tamoxifen的存在才能激活。 通过将Tmem119- CreERT2与荧光报告基因小鼠基因交配发现,Tamoxifen诱导的...
研究者发现,肺间质巨噬细胞高水平表达跨膜蛋白119的编码基因(Tmem119)和fractalkine受体的编码基因(Cx3cr1)。于是,研究者将Tmem119Cre小鼠(由赛业生物提供)和Cx3cr1LSL-DTR小鼠杂交,构建了白喉毒素(DT)诱导的肺IM生态位耗竭的转基因小鼠模型(IMDTR)。向IMDTR小鼠的腹腔注射白喉毒素24小时后,CD206+IM和CD206-I...
长期以来对小胶质细胞特异性操控主要是借助Cx3趋化因子受体1(Cx3cr1)作为启动子的Cre小鼠模型来实现,但是CX3CR1在脑膜相关巨噬细胞和外周单核巨噬细胞中表达,不能特异性代表小胶质细胞。 现已任职于哈佛医学院的神经免疫学家Butovsky于201...
Tmem119-CreERT2小鼠构建 Cre蛋白是一种存在大肠杆菌噬菌体P1的重组酶,它可以特异性识别细胞内基因或DNA上的LoxP序列并根据LoxP序列的位置和LoxP序列之间的关系,介导不同的特异性重组反应。 条件性基因敲除的基本原理利用的重组方式是:当两个LoxP位点位于一条DNA链上且方向相同Cre重组酶能有效地敲除两个LoxP位点间的...
我们利用CRISPR/Cas9技术在Tmem119基因的终止密码子前插入了2A-CreERT2基因盒,使得Cre重组酶具有Tmem119启动子特异性,且需要tamoxifen的存在才能激活。 通过将Tmem119- CreERT2与荧光报告基因小鼠基因交配发现,Tamoxifen诱导的Tmem119- CreERT2系可以在很长一段时间内对小胶质细胞产生稳定的遗传修饰。
| tmem119可能不是小胶质细胞有效的特异性操控工具 爱大脑就aibrain 中枢神经系统小胶质细胞是脑实质中唯一的一类固有免疫细胞,对其功能的研究有助于理解中枢神经系统稳态的内在维持机制. 长期以来对小胶质细胞特异性操控主要是借助cx3趋化因子受体1(cx3cr1)作为启动子的cre小鼠模型来实现,但是cx3cr1在脑膜相关巨噬...
为了评估Tmem119-CreERT2小鼠诱导后在小胶质细胞中是否有Cre活性,我们将Tmem119-CreERT2小鼠与R26-LSL-tdTomato报告小鼠进行杂交。 实验表明:无Tamoxifen诱导的对照组中,检测不到tdTomato的表达,只有经Tamoxifen诱导后,小胶质细胞才能够表达tdTomato(Fig4. A-B)。
为此,南模生物自主研发,构建了一种新的小胶质细胞基因靶向模型,Tmem119-CreERT2工具小鼠,该小鼠可用于特异性研究小胶质细胞的功能。 TMEM119蛋白的发现 早在2016年,斯坦福大学医学院Mariko L. Bennett等人在顶尖杂志PNAS发表了一篇文章,对小胶质细胞的特异性标志物进行了深入探究。
图1 Tmem119-CreERT2小鼠在小胶质细胞中具有高表达。 A. 经Tamoxifen和玉米油分别处理,荧光检测Tmem119-CreER;R26-tdTomato小鼠中tdTomato的表达情况。 B. 荧光检测Tmem119-CreER;R26-tdTomato小鼠IBA1 阳性细胞中有tdTomato的表达。 C. 荧光检测Tmem119-CreER;R26-tdTomato小鼠小胶质细胞(Tmem119,Tdtomato)与星...
图1 Tmem119-CreERT2小鼠在小胶质细胞中具有高表达。 A. 经Tamoxifen和玉米油分别处理,荧光检测Tmem119-CreER;R26-tdTomato小鼠中tdTomato的表达情况。 B. 荧光检测Tmem119-CreER;R26-tdTomato小鼠IBA1 阳性细胞中有tdTomato的表达。 C. 荧光检测Tmem119-CreER;R26-tdTomato小鼠小胶质细胞(Tmem119,Tdtomato)与星...