THP-1细胞为悬浮细胞且具有低密度依赖性,一般超过10^6/ml传代,比例一般为1:3/1:4,因此目前利用的两种传代方式: (1)半换液传代(不用离心):吸取培养瓶或者培养皿中的细胞移至新的培养瓶或者培养皿中,补足培养基2-3ml。 (2)传统的离心传代:将瓶子或皿中的细胞吸取至15mL离心管中,700-800rpm,离心5min;弃...
1. 补液法：培养基变黄时可补加适量（1~2mL）新鲜培养基，补加1-2次之后，用离心的方式全部换液，离心1200rpm （约250g）3分钟。2. 半换液法：以T25瓶子为例，瓶子里装有5mL培养基。竖起瓶子静置一段时间，待细胞沉底（以肉眼观察到沉底为限），小心吸出2.5mL的培养基，转移到离心管，离心1200rpm （约...
THP-1细胞的培养方法和注意事项: 一、培养方法: 1.培养基:使用含有10%胎牛血清(FBS)的RPMI 1640培养基,确保无菌且不含抗生素。 2.细胞接种:以每孔1×10^5个细胞接种到96孔板,在37℃、5%二氧化碳的细胞培养箱中培养。 3.培养时间:通常情况下,每2-3天更换一次培养基,根据细胞生长情况决定传代时间。 4.细胞...
细胞培养:THP-1细胞培养于含有10%FBS+1%P/S的RPMI-1640培养基中,培养环境为37℃,5%CO2。可以每隔3-4天加一些新鲜的培养基,或直接传代。 细胞传代:当细胞密度达到约8x10^5cells/ml左右时,即可进行传代。由于是悬浮细胞,可直接将细胞吸出,离心之后传代。传代最少浓度不应少于1x10^5 cells/ml。 细胞冻存:取...
01 THP-1的培养方法 培养条件: RPMI-1640+10% FBS+0.05mM β-巯基乙醇+1% 双抗 到货处理 用75%酒精棉球擦拭 T25 细胞培养瓶外部,观察细胞生长情况。 1.不要打开培养瓶盖,将细胞放入 37℃培养箱中静置 3-4 小时后再做处理,以稳定细胞状态。
THP-1是人外周血的单核细胞系,最初来源于急性单核细胞性白血病患者。属于悬浮细胞,适合用于转染或感染实验。其表面抗原HLA型为:A2,A9,B5,DRw1,DRw2。 细胞复苏 细胞复苏步骤 1. 预热水浴锅至37℃2. 准备一个15mL离心管,加入2-3mL左右完全培养基待用3. 将细胞从-80℃冰箱或液氮中取出后,放进一次性PE手套...
一、THP-1细胞的培养方法 1、复苏THP-1细胞 首先，准备离心管、培养瓶、RPMI 1640培养基、胎牛血清、双抗、酒精瓶和酒精棉球等必要的实验室用品。使用酒精棉球清洁实验台，并使用紫外灯照射30分钟，确保环境的无菌性。随后，将保存在-80℃或液氮中的细胞快速解冻，并将细胞复苏在无菌条件下。配置培养...
THP-1偏爱微酸环境，培养基pH要稳定，尽量使用同Ph的RPMI-1640，以确保最佳生长条件。传代后，切勿频繁观察，以免打扰细胞生长。一般建议传代后3-4天再评估，那时你可能会发现培养基变黄，细胞数量显著增加。记住，THP-1喜欢酸性，培养基越酸，细胞密度越高，生长效果越好。换液频率保持在2-3次/天，...
THP-1单核细胞正常形态为悬浮的体积较小、透亮的圆形细胞,少数聚团成葡萄状,粒粒饱满,轮廓清晰(如图3)。该细胞在偏酸性环境中,生长更快,所以当培养基稍微变黄(呈橘红色)时,是比较适合细胞生长的,此时补液或半换液即可;开启后的1640培养基,长期放置pH会偏高,建议开封后一周内使用完毕。该细胞对血清要求高,血清...
建立了皮肤模型与THP-1细胞共培养方法,对石化产品进行了致敏性评价.不同浓度测试物与表皮模型作用15 min,去除受试物后孵育6 h,使用MTT法检测皮肤模型组织活率,利用流式细胞法检测THP-1细胞表面标志物CD86,CD54表达变化情况以及细胞活率.对上述参数进行统计学分析及是否存在剂量效应关系,判定测试物是否具有潜在致敏特...