THP-1细胞为悬浮细胞且具有低密度依赖性,一般超过10^6/ml传代,比例一般为1:3/1:4,因此目前利用的两种传代方式: (1)半换液传代(不用离心):吸取培养瓶或者培养皿中的细胞移至新的培养瓶或者培养皿中,补足培养基2-3ml。 (2)传统的离心传代:将瓶子或皿中的细胞吸取至15mL离心管中,700-800rpm,离心5min;弃...
若培养基中不添加β-巯基乙醇，长期培养细胞可能会出现大量贴壁，严重聚团等情况。THP-1 细 胞 换 液 方 法 离心换液法：1. 准备所需的培养基、离心管以及无菌枪头等；（培养基提前预热）2. 将所有细胞悬液转移至离心管中；3. 900-1000rpm，3min离心；4. 弃上清，加5mL PBS轻轻重悬细胞进行润洗，...
1. 补液法：培养基变黄时可补加适量（1~2mL）新鲜培养基，补加1-2次之后，用离心的方式全部换液，离心1200rpm （约250g）3分钟。2. 半换液法：以T25瓶子为例，瓶子里装有5mL培养基。竖起瓶子静置一段时间，待细胞沉底（以肉眼观察到沉底为限），小心吸出2.5mL的培养基，转移到离心管，离心1200rpm （约...
1. THP-1细胞在偏酸性环境中生长更快，所以当培养基稍微变黄（呈橘红色）时，是适合细胞生长的，此时补液或半换液即可；2. THP-1细胞培养液中需添加β-巯基乙醇（细胞培养级别），若不添加，可能会对细胞状态造成影响；3. THP-1细胞比较难复苏，复苏初期细胞生长缓慢且会有部分细胞破碎，出现黑色细胞碎片，少量...
首先，了解一下THP-1的基本信息。图1 THP-1细胞生长正常图片 细胞复苏：1) 准备工作：将完全培养液置37℃水浴锅预热30分钟。2)在超净台内吸取7 mL完全培养液至15 mL离心管中 3)将细胞从干冰里取出，用镊子夹住盖子放入37℃水浴中快速晃动（注意：水不能没过盖子），使其在1分钟左右完全融化；4)将细胞悬液...
图1 1640基础培养基(abs9484)和胎牛血清(特级)(abs972) 图2 THP-1(人单核细胞白血病细胞) THP-1单核细胞正常形态为悬浮的体积较小、透亮的圆形细胞,少数聚团成葡萄状,粒粒饱满,轮廓清晰(如图3)。该细胞在偏酸性环境中,生长更快,所以当培养基稍微变黄(呈橘红色)时,是比较适合细胞生长的,此时补液或半换液...
THP-1的培养方法 培养条件: RPMI-1640+10% FBS+0.05mM β-巯基乙醇+1% 双抗 到货处理 用75%酒精棉球擦拭 T25 细胞培养瓶外部,观察细胞生长情况。 1.不要打开培养瓶盖,将细胞放入 37℃培养箱中静置 3-4 小时后再做处理,以稳定细胞状态。 2.通过离心的方式收集细胞,然后将细胞沉淀加入5-8ml的完全培养基轻...
THP-1是人外周血的单核细胞系,最初来源于急性单核细胞性白血病患者。属于悬浮细胞,适合用于转染或感染实验。其表面抗原HLA型为:A2,A9,B5,DRw1,DRw2。 (海星特惠890元,再送细胞完全培养基) 细胞复苏 细胞复苏步骤 1. 预热水浴锅至37℃2. 准备一个15mL离心管,加入2-3mL左右完全培养基待用3. 将细胞从-80℃...
THP-1细胞系是1980年建立的人单核细胞白血病细胞系，从一位患有急性单核细胞白血病的小男孩外周血中分离得到，有分化多种巨噬细胞的能力，被广泛应用于单核细胞和巨噬细胞的相关机制、免疫和炎症信号通路等研究。NOTES 细胞培养注意事项 1、该细胞冻存后复苏率较低，冻存时请酌情提高细胞量，冻存时活细胞密度不能...
THP-1细胞对血清要求高，建议选用高质量的胎牛血清。细胞密度低时生长较慢，可通过补液、换液或传代来维持适宜的细胞密度。细胞在偏酸性环境中生长更快，当培养基稍微变黄（呈橘红色）时，是比较适合细胞生长的。少量细胞贴壁属于正常情况，将细胞悬液转移至新瓶中即可。当贴壁细胞的比例高于20%时，说明细胞生长...