用PMA孵育THP-1细胞48h,显示THP-1(40X)在(A)诱导前(B)诱导后的形态学变化。它们的形态由圆形变为细长和扁平。巨噬细胞进一步诱导成M1型实验步骤:(1)诱导培养基的配置:向1640完全培养基(含胎牛血清)里加入PMA(诱导浓度:100ng/mL)、脂多糖(LPS)(诱导浓度:100ng/mL)(abs47014848)、IF
THP-1细胞通常用佛波酯(PMA)诱导分化为巨噬细胞,然后在PMA仍然存在的情况下: 脂多糖(LPS)(100ng/mL)、IFN-γ(20ng/mL)培养48h,诱导其向M1极化; IL-4(20ng/mL)、IL-13(20ng/mL)培养48h,诱导其向M2极化; 最后,在无刺激物和无PMA的情况下,用无血清RPMI-1640培养基重悬细胞,可保持72h。 图1. 巨噬...
THP-1是人急性单核细胞白血病细胞,是单核-巨噬细胞相关研究中的常用细胞系工具,可通过PMA(佛波酯)诱导分化为M0型巨噬细胞,然后根据实验需求进一步诱导为M1或M2型巨噬细胞。细胞形态:悬浮细胞,圆形,大小均…
加入终浓度为100ng/ml的PMA,24孔培养板中加入1ml细胞悬液,诱导分化24h,替换成新鲜RPMI 1640完全培养...
接着进行诱导过程。将 THP-1 细胞接种在合适的培养容器中,如培养瓶或培养板。根据细胞密度和实验需求,加入适量的 PMA 溶液,使终浓度达到一定范围,通常在 10 - 100 ng/mL 之间。加入 PMA 后,将细胞置于适宜的培养条件下,一般为 37℃、5% CO₂ 的培养箱中。在诱导过程中,需要密切观察细胞的变化。在...
用PMA孵育THP-1细胞48h,显示THP-1(40X)在(A)诱导前(B)诱导后的形态学变化。它们的形态由圆形变为细长和扁平。 巨噬细胞进一步诱导成M1型实验步骤: (1)诱导培养基的配置:向1640完全培养基(含胎牛血清)里加入PMA(诱导浓度:100ng/mL)、脂多糖(LPS)(诱导浓度:100ng/mL)(abs47014848)、IFN-γ(诱导浓度:20...
THP-1 的诱导分化 THP-1 是体外研究原代人巨噬细胞功能中使用最广泛的细胞系。原因是在使用 PMA 分化 THP-1细胞后,它们获得了一种类似巨噬细胞的表型,该表型在许多方面类似于原代人巨噬细胞(M0 巨噬细胞)。PMA 是蛋白激酶 C (PKC) 的有效激活剂,而PKC 是巨噬细胞分化的关键调节因子。当 PMA 添加到...
1.PMA诱导:通常使用佛波酯(PMA)将THP-1单核细胞分化为巨噬细胞样细胞。常用方法是将THP-1细胞与150 nM的PMA孵育24小时。之后,将细胞在RPMI培养基中继续培养24小时,以使其稳定并成熟为M0巨噬细胞。2.细胞培养条件:在含10%胎牛血清、10 mM Hepes、1 mM丙酮酸盐和50 µM β-巯基乙醇的RPMI 1640培养基中...
THP-1细胞的极化及鉴定过程如下:将细胞用RPMI 1640完全培养基重悬,加入终浓度为100ng/ml的PMA进行24h诱导分化。随后,将细胞分为两组进行极化:一组加入10ng/ml的LPS和20ng/ml的人类IFN-γ,另一组加入20ng/ml的人类IL-4和20ng/ml的人类IL-13。通过qRT-PCR、ELISA、流式细胞术等方法对细胞...
THP-1细胞是从急性单核细胞白血病患者外周血中分离出来的单核细胞,广泛应用于单核细胞和巨噬细胞相关机制、信号通路等研究;形态和分化特性类似于原代单核细胞和巨噬细胞,在体外,常用PMA(phorbol 12-肉豆酸酯13-乙酸酯)或1α,25(OH)2D3 (1α,25-二羟基维生素D3或vD3)诱导分化THP-1细胞为巨噬细胞。因此,THP...