用PMA孵育THP-1细胞48h，显示THP-1(40X)在(A)诱导前(B)诱导后的形态学变化。它们的形态由圆形变为细长和扁平。巨噬细胞进一步诱导成M1型实验步骤：（1）诱导培养基的配置：向1640完全培养基（含胎牛血清）里加入PMA（诱导浓度：100ng/mL）、脂多糖(LPS)(诱导浓度：100ng/mL)(abs47014848)、IFN-γ(诱导浓...
1. THP-1细胞诱导成M0型巨噬细胞 培养THP-1细胞:将THP-1细胞置于含有10%胎牛血清(FBS)的RPMI-1640培养基中,细胞密度控制在1×10^6 cells/mL左右。 PMA诱导:加入100 nM的佛波酯(PMA, Phorbol 12-myristate 13-acetate),刺激24-48小时,使THP-1细胞贴壁并分化为M0型巨噬细胞。 洗涤:用PBS缓冲液轻轻洗涤细...
使用佛波醇-12-肉豆蔻酸-13-乙酸酯 (PMA) 诱导 步骤: 将THP-1细胞接种在培养板中,细胞密度通常为5x10^5 cells/mL。 添加终浓度为50 nM至100 nM的PMA到培养基中。 将细胞在37°C、5% CO2培养箱中孵育24至48小时。 诱导后,THP-1细胞会贴壁并显示出类似巨噬细胞的形态。可通过PBS洗涤以去除未分化的悬浮...
首先，准备工作至关重要。确保实验所用的 THP-1 细胞处于良好的生长状态，细胞活性高且无污染。准备适量的 PMA 储备液，一般将 PMA 溶解在 DMSO（二甲基亚砜）中配制成高浓度储备液，以便后续使用。接着进行诱导过程。将 THP-1 细胞接种在合适的培养容器中，如培养瓶或培养板。根据细胞密度和实验需求，加入适量的...
THP-1是人急性单核细胞白血病细胞,是单核-巨噬细胞相关研究中的常用细胞系工具,可通过PMA(佛波酯)诱导分化为M0型巨噬细胞,然后根据实验需求进一步诱导为M1或M2型巨噬细胞。 细胞形态:悬浮细胞,圆形,大小均一,小而透亮(下图Fig1来自ATCC网站)。 注意:显微镜下观察之前,可以轻轻晃动培养瓶或孔板,静置片刻后使得细胞...
🔬 诱导THP-1细胞分化为巨噬细胞 取一支10μl PMA母液(含10μg PMA),加入990μl无FBS的1640培养基,配制成1ml的10μg/ml PMA工作液,即10ng/μl。 对于5ml培养瓶,添加50μl PMA工作液;六孔板每孔添加20μl。📊 实验步骤 细胞计数:对THP-1细胞进行计数,离心重悬后控制细胞密度为4×10^5/ml。
1.PMA诱导:通常使用佛波酯(PMA)将THP-1单核细胞分化为巨噬细胞样细胞。常用方法是将THP-1细胞与150 nM的PMA孵育24小时。之后,将细胞在RPMI培养基中继续培养24小时,以使其稳定并成熟为M0巨噬细胞。2.细胞培养条件:在含10%胎牛血清、10 mM Hepes、1 mM丙酮酸盐和50 µM β-巯基乙醇的RPMI 1640培养基中...
首先,培养THP-1细胞,并使用诱导剂如Phorbol 12-myristate 13-acetate(PMA)进行极化。通常使用50 ng/mL或100 ng/mL的PMA处理24-48小时,以诱导THP-1细胞分化为巨噬细胞。 处理后,移除PMA,并用新鲜培养基孵育24小时,让细胞恢复并达到M0状态。形态变化: ...
THP - 1 细胞作为人单核细胞白血病细胞系,在科研领域常被用于诱导分化为巨噬细胞,以模拟体内巨噬细胞功能与特性,而佛波酯(PMA)是诱导这一过程的关键试剂。以下详述操作要点。 前期准备至关重要。先确保细胞培养环境稳定适宜,在含 10% 胎牛血清、1% 青 - 链霉素的 RPMI 1640 培养基里,将 THP - 1 细胞置于 ...
重悬细胞至2-10×10^5/ml，加入终浓度为100ng/ml的PMA，24孔培养板中加入1ml细胞悬液，诱导分化...