按照“1.3”和“1.4”中的方法处理细胞后,提取各组蛋白,用BCA蛋白定量检测试剂盒测定蛋白浓度,进行SDS-PAGE凝胶电泳,湿转至已用甲醇激活的PVDF膜上,用含5%脱脂奶粉的TBS室温封闭1 h,分别过夜孵育β-actin(1∶3 000稀释)、NLRP3 (1∶1 000稀释)、ASC(1∶1 000稀释)、Caspase-1(1∶1 000稀释)、PERK(1∶...
2个工作日 NLRP3基因敲除THP-1细胞(单克隆)NLRP3 gene knockout cell(monoclonal) 介绍 产品详情 储存条件:T25瓶:观察好细胞状态后,75%酒精消毒T25瓶外壁,将T25瓶置于37度培养箱放置2-4h,以便稳定细胞状态后传单;冻存管:收到细胞后,需立即转入液氮冻存或直接复苏...
NLRP3炎症小体的组装能够导致效应蛋白caspase‑1活化,进而促进IL‑1β成熟和分泌并启动炎症过程。 为了验证HMGB1对NLRP3炎症小体表达的影响,我们分别在RSV感染的THP‑1单核细胞中加入外源性rHMGB1和HMGB1抑制剂甘草素,共培养后检测NLRP3炎症小体表达情况,结果显示,rHMGB1可显著增加NLRP3、ASC、caspase‑1的蛋白...
于是作者将NLRP3、ASC和caspase-1与pro-IL-1β的野生型或突变型共转染293T细胞，并用ATP刺激，通过免疫印迹（图2G）和ELISA（图2H）实验发现，K143R突变会阻止pro-IL-1β剪切成活性的IL-1β，从而判断K143是pro-IL-1β加工的关键位点。随后再次通过免疫印迹检测转染了编码野生型pro-IL-1b-myc及其不同突变...
特别是NLRP3炎症小体基因的表达增高,并且NLRP3炎症小体相关蛋白的表达也增高,我们还用激光共聚焦显微镜检测了NLRP3炎症小体在HTNV感染THP-1细胞后的定位情况,分别从基因和蛋白水平证实了HTNV感染可以引起NLRP3炎症小体的激活.此外,我们使用NLRP3siRNA和caspase-1抑制剂,进一步验证了NLRP3炎症小体在HTNV感染中的作用...
THP-1 cells are widely used for inflammasome studies due to their high expression levels of NLRP3, ASC, and pro-caspase-1. • THP1-KO-NLRP3 cells –Knockout (KO) of the N-terminal region of the NLRP3 gene• THP1-defNLRP3 cells –Knockdown (KD) of the NLRP3 gene...
于是作者将NLRP3、ASC和caspase-1与pro-IL-1β的野生型或突变型共转染293T细胞,并用ATP刺激,通过免疫印迹(图2G)和ELISA(图2H)实验发现,K143R突变会阻止pro-IL-1β剪切成活性的IL-1β,从而判断K143是pro-IL-1β加工的关键位点。随后再次通过免疫印迹检测转染了编码野生型pro-IL-1b-myc及其不同突变基因载体...
中山大学研究团队在探讨调整ANXA1/NLRP3/Caspase-1/GSDMD通路改善巨噬细胞焦亡相关研究中,使用RFect siRNA转染试剂将靶向NLRP3的siRNA转染到人单核细胞白血病细胞THP-1细胞中进行敲低实验。qRT-PCR结果显示,转染后实验组中NLRP3的表达与对照组相比可被敲低75%左右。相...
中山大学研究团队在探讨调整ANXA1/NLRP3/Caspase-1/GSDMD通路改善巨噬细胞焦亡相关研究中,使用RFect siRNA转染试剂将靶向NLRP3的siRNA转染到人单核细胞白血病细胞THP-1细胞中进行敲低实验。qRT-PCR结果显示,转染…
于是作者将NLRP3、ASC和caspase-1与pro-IL-1β的野生型或突变型共转染293T细胞,并用ATP刺激,通过免疫印迹(图2G)和ELISA(图2H)实验发现,K143R突变会阻止pro-IL-1β剪切成活性的IL-1β,从而判断K143是pro-IL-1β加工的关键位点。随后再次通过免疫印迹检测转染了编码野生型pro-IL-1b-myc及其不同突变基因...