THP-1 细 胞 传 代 方 法 离心法：1. 取少量细胞悬液进行计数确定细胞密度，密度80万/mL以上传代，并根据计数结果确定传代比例；2. 准备所需的培养基、离心管以及无菌枪头等；（培养基提前预热）3. 用移液器吸取培养瓶内细胞悬液转移至离心管中；4. 900-1000rpm，3min离心收集细胞；5. 在培养瓶...
选择品质好的血清更有利于THP-1细胞生长 THP-1生长图片 培养攻略之收货篇 1.常温细胞:收到细胞后,放进培养箱静置2-4小时,之后将瓶中培养基全部离心(1200rpm或250g,3分钟),去上清,用适量新鲜培养基重悬细胞,按比例接种到新培养瓶中。 2.冻存细胞:收到细胞后,如果不复苏,放进-80℃冰箱暂存或放进液氮长期保...
培养环境:37℃、5%CO2 传代比例:1:2~1:4 传代频次:2~3天传代一次THP-1单核细胞正常形态为悬浮的体积较小、透亮的圆形细胞,少数聚团成葡萄状,粒粒饱满,轮廓清晰。该细胞在偏酸性环境中,生长更快,所以当培养基稍微变黄(呈橘红色)时,是比较适合细胞生长的,此时补液或半换液即可。开启后的1640培养基,长期放置...
首先,我们要讨论的是THP-1贴壁问题。THP-1细胞培养过程中出现少量细胞贴壁属于正常情况(如图4),不需要担心。可以轻吹收集细胞或者丢弃贴壁部分细胞。但如果当贴壁细胞比例高于20%,说明细胞生长环境有异常,这时候就需要排查培养箱温度及CO2浓度、培养基成分,以及培养器皿是否异常。可用非TC处理过的培养瓶,不利于细胞贴壁。
换液方法: 补液法:初始加入5ml培养基,隔天补充2ml,一周后离心换液。避免频繁离心以免机械损伤。THP-1细胞生长具有密度依赖性,低密度时可将T25培养瓶立起来以提高局部密度。 半换液:将培养瓶立起来放入培养箱30分钟,小心吸出一半(2-3ml)培养基,然后加入等量新鲜培养基。
1. THP-1细胞冻存过后复苏困难: a. 冻存前细胞状态较好, 冻存总量不低于1*106/支 b. 复苏后细胞接种密度建议3*106/ml C. 如有细胞碎片,待细胞密度增大后通过低速离心去除 THP-1细胞传代后出现细胞贴壁现象: A. 如轻微贴壁,可以轻吹收集细胞或者丢弃贴壁部分细胞 B. 如贴壁较多,需检查培养条件是否合适 ...
THP-1是人外周血的单核细胞系,最初来源于急性单核细胞性白血病患者。属于悬浮细胞,适合用于转染或感染实验。其表面抗原HLA型为:A2,A9,B5,DRw1,DRw2。 | 细胞复苏 1. 预热水浴锅至37℃ 2. 准备一个15mL离心管,加入2-3mL左右完全培养基待用 3. 将细胞从-80℃冰箱或液氮中取出后,放进一次性PE手套中,立即...
THP-1细胞似乎更喜欢偏酸性的环境。当培养基呈现橘色时,表明pH值较为适宜,这时候细胞的生长状态最佳。 控制细胞密度 📊 在进行细胞传代时,尽量让细胞密度更高一些。如果细胞密度过低,会导致细胞状态不佳甚至死亡。一般建议将细胞浓度控制在较高水平,比如1.0×10^6 cells/mL,这样可以为细胞提供更好的生长环境。
加入IL-4(诱导浓度:20ng/mL)(abs04698)、IL-13(诱导浓度:20ng/mL)(abs04079)培养48h,诱导其向M2极化; 最后,在无刺激物和无PMA的情况下,用无血清RPMI-1640基础培养基重悬细胞,可保持72h。 诱导步骤 THP-1诱导分化成巨噬细胞实验步骤: (1)THP-1细胞的培养:更多培养技巧可查看THP-1细胞培养攻略 ...
🌿 THP-1细胞是一种单核细胞,它们在正常状态下是悬浮的、体积较小且透亮的圆形细胞,有时会聚集成葡萄状,看起来饱满且轮廓清晰。🌊 这些细胞在偏酸性的环境中生长得更快。当培养基开始变黄(呈橘红色)时,就是它们生长的最佳时机。此时,你可以选择补液或进行半换液操作。📅...