使用PMA诱导分化后的THP-1细胞。 在培养基中添加100 ng/mL LPS和20 ng/mL IFN-γ。 继续培养24至48小时。 M1型巨噬细胞具有增强的杀菌和促炎作用,可以通过检测TNF-α、IL-6等标志物来验证极化效果。3. M2型巨噬细胞极化(替代激活) 诱导剂:IL-4 (白细胞介素-4) 和 IL-13 (白细胞介素-13) 步骤: ...
首先,培养THP-1细胞,并使用诱导剂如Phorbol 12-myristate 13-acetate(PMA)进行极化。通常使用50 ng/mL或100 ng/mL的PMA处理24-48小时,以诱导THP-1细胞分化为巨噬细胞。 处理后,移除PMA,并用新鲜培养基孵育24小时,让细胞恢复并达到M0状态。形态变化: 单核细胞THP-1在PMA诱导后,从悬浮式生长变为贴壁生长。细胞...
thp-1诱导向m1极化实验步骤 通过实验可以有效诱导THP-1细胞向M1巨噬细胞极化。本文将详细介绍THP-1细胞的培养、诱导向M1巨噬细胞极化的步骤,以及相关的实验控制。该实验步骤包括培养条件的设定、细胞处理、细胞相关试验和数据分析。 1. THP-1细胞培养 - THP-1细胞的培养基为RPMI 1640,加入10%胎牛血清(FBS)和1%...
首先,THP-1诱导分化为巨噬细胞这个实验真的是很难做,THP-1是本实验最大的变量,以本人经验 1.M1诱导是比较稳定的,CD86表达85%以上,CD86的极化程度和LPS浓度相关2.M2比较难诱导,比例10%左右,文献报道,降低PMA的浓度、M0后静息,有利于M2方向诱导3.细胞因子严格分装,勿反复冻融,以减少实验的干扰项4.实在不行,...
thp-1诱导向m1极化实验步骤 为了更好地展示实验步骤,我将使用项目符号来呈现。请注意,由于题目没有提供具体的实验内容和相关背景知识,以下是一个假设的实验步骤。这仅是一个示例,并不代表实际实验中的详细步骤。 实验步骤如下: 1. THP-1细胞培养 -使用无菌操作将THP-1细胞分散在含有适当培养基的细胞培养器中。
【摘要】目的:通过共培养体系探究瘢痕疙瘩成纤维细胞(Keloid fibroblast, KF)及正常皮肤成纤维细胞(Normal fibroblast, NF)在影响佛波酯(PMA)诱导THP-1形成的M0型巨噬细胞细胞极化、炎症因子表达方面的差异,探索KF对巨噬细胞分化、细胞因...
第一章建立THP-1源性巨噬细胞M1型极化诱导模式目的:确立THP-1细胞体外分化为M1型巨噬细胞的诱导条件,并检测该条件下M1型极化相关的细胞内信号分子通路活化状况及下游细胞因子表达。方法:采用PMA刺激THP-1成为巨噬细胞(M0)后,再用不同浓度的LPS+20ng/ml rhIFN-γ 诱导或用 1000ng/ml LPS+20ng/mlrhIFN-γ ...
ROP16过表达对THP-1诱导分化巨噬细胞极化的影响 摘要 著录项 2020年第5期 赵志军; 宁夏医科大学临床医学院 银川 750004; 宁夏医科大学临床病原微生物重点实验室 银川 750004; 宁夏医科大学临床病原微生物重点实验室 银川 750004; 宁夏医科大学总医院医学实验中心 银川 750004;...
THP-1 用185ng/ml佛波酯(PMA,用DMSO溶解)作用6小时,诱导细胞分化为巨噬细胞。然后,在PMA继续存在的情况下,通过分别: •与IFN-γ(20 ng/ml)和LPS(100 ng/ml)孵育48小时以上,使其向M1极化。•与IL-4(20 ng/ml)和IL-13(20 ng/ml)孵育48小时以上,使其向M2表型极化。