THP-1 是体外研究原代人巨噬细胞功能中使用最广泛的细胞系。原因是在使用 PMA 分化 THP-1细胞后，它们获得了一种类似巨噬细胞的表型，该表型在许多方面类似于原代人巨噬细胞（M0 巨噬细胞）。PMA 是蛋白激酶 C （PKC） 的有效激活剂，而PKC 是巨噬细胞分化的关键调节因子。当 PMA 添加到 THP-1 细胞中时，...
1.PMA诱导:通常使用佛波酯(PMA)将THP-1单核细胞分化为巨噬细胞样细胞。常用方法是将THP-1细胞与150 nM的PMA孵育24小时。之后,将细胞在RPMI培养基中继续培养24小时,以使其稳定并成熟为M0巨噬细胞。2.细胞培养条件:在含10%胎牛血清、10 mM Hepes、1 mM丙酮酸盐和50 µM β-巯基乙醇的RPMI 1640培养基中...
首先,我们需要在6孔板里铺细胞。具体来说,每孔加入200万细胞(贴壁后细胞密度大概80%-90%),然后加入80ng/mL的PMA(这个PMA是MCE的HY-18739,用DMSO溶解)。最后,每孔再加2mL完全培养基,然后诱导24小时。 镜下观察 🔬 24小时后,你可以在显微镜下看看细胞状态。你会发现细胞几乎全都贴壁了,有些还成了梭形,胞...
当PMA 添加到 THP-1 细胞中时,它使它们表达表面标志物 CD14、CD16 和 CD68,这是 M0 巨噬细胞的特征。PMA 还诱导 M0 巨噬细胞产生促炎细胞因子。在被诱导为M0细胞后,继续用 PMA 联合其他因子进一步处理,就可以激活 M0 巨噬细胞并将其分化为 M1 或 M2 巨噬细胞。 具体诱导过程见下图 图片引用自:https:/...
1.THP-1细胞的诱导分化 (1)THP-1用185ng/ml佛波酯(PMA,用DMSO溶解)作用6小时,诱导细胞分化为巨噬细胞(M0)。 (2)在PMA继续存在的情况下,通过分别: •与IFN-γ(20 ng/ml)和LPS(100 ng/ml)孵育48小时以上,使其向M1表型极化。 •与IL-4(20 ng/ml)和IL-13(20 ng/ml)孵育48小时以上,使其向M2...
可见,用200ng/mL PMA刺激 72小时后,悬浮的 THP-1 单核细胞分化为 M0 巨噬细胞,粘附在细胞壁上,并有伸展的突起。接着,再用20ng/mL IFN-γ和 100ng/mL LPS(诱导向M1分化) 或20ng/mL IL-4(诱导向M2分化) 处理 24小时后,巨噬细胞呈现较大的胞体和较长的突起,说明可能分别往M1或M2分化了。
THP-1 用185ng/ml佛波酯(PMA,用DMSO溶解)作用6小时,诱导细胞分化为巨噬细胞。然后,在PMA继续存在的情况下,通过分别: •与IFN-γ(20 ng/ml)和LPS(100 ng/ml)孵育48小时以上,使其向M1极化。•与IL-4(20 ng/ml)和IL-13(20 ng/ml)孵育48小时以上,使其向M2表型极化。
【摘要】目的:通过共培养体系探究瘢痕疙瘩成纤维细胞(Keloid fibroblast, KF)及正常皮肤成纤维细胞(Normal fibroblast, NF)在影响佛波酯(PMA)诱导THP-1形成的M0型巨噬细胞细胞极化、炎症因子表达方面的差异,探索KF对巨噬细胞分化、细胞因...
目的优化诱导THP-1细胞分化为M0型巨噬细胞所需的佛波酯(PMA)浓度和刺激时间.为研究生物活性材料对巨噬细胞表型和功能的调控作用奠定实验基础.方法分析不同PMA浓度与刺激时间下THP-1细胞的形态,贴壁程度,M0型巨噬细胞表面标志物以及巨噬细胞M1和M2表型相关基因的表达.结果在25~100 ng/mL PMA浓度范围和24~72 h刺...