1. 转染效率受转染质粒本身效果影响。瞬时转染宜使用超螺旋DNA;在稳定转染中,细胞对线性DNA的摄取水平低于超螺旋DNA,但它将DNA整合至宿主基因组中的效果更好;2. 一般培养基中加入血清会促进DNA的转染。但脂质体转染和转染RNA时,最好在无血清的情况下进行;3. 在转染之前更换培养基,可提高转染效率,所用培养...
4.细胞换液:转染24小时后对细胞进行正常换液,悬浮细胞转染过程中不用换液。 5.分析结果:质粒DNA转染48-72小时后荧光检测转染效率,48-96小时检测mRNA或蛋白表达。若进行稳定表达细胞株的筛选,则在转染后24-48小时左右加入适量的药物进行筛选。siRNA转染后9小时荧光检测转染效率,48-72小时检测mRNA或蛋白表达。 二、...
转染质粒组织构建组织工程转染效率THP-1单核细胞DEAE-葡聚糖脂质体国家自然科学基金背景:人单核细胞系THP-1细胞是典型的悬浮细胞系,其转染并瞬时表达外源蛋白比一般贴壁细胞相对困难。其中DEAE-葡聚糖介导的细胞转染方法虽然建立较早,但在国内应用很少。目的:采用不同质粒转染方法介导质粒绿色荧光蛋白真核表达质粒(pEGFP...
APS可阻止LPS诱导的THP-1巨噬细胞p65从细胞质向细胞核的易位。然而,在APS处理的THP-1巨噬细胞中,WTAP过表达促进了p65从细胞质向细胞核的易位。为了更好地研究p65的核和细胞质分布,从THP-1巨噬细胞中提取核和细胞质蛋白。结果显示,在转染WTAP过表达质粒的THP-1巨噬细胞中,APS介导的p65向细胞核转运的抑制被逆转...
WTAP过表达不影响THP-1巨噬细胞中p65的总体表达水平。APS可阻止LPS诱导的THP-1巨噬细胞p65从细胞质向细胞核的易位。然而,在APS处理的THP-1巨噬细胞中,WTAP过表达促进了p65从细胞质向细胞核的易位。为了更好地研究p65的核和细胞质分布,从THP-1巨噬细胞中提取核和细胞质蛋白。结果显示,在转染WTAP过表达质粒的...
WTAP过表达不影响THP-1巨噬细胞中p65的总体表达水平。APS可阻止LPS诱导的THP-1巨噬细胞p65从细胞质向细胞核的易位。然而,在APS处理的THP-1巨噬细胞中,WTAP过表达促进了p65从细胞质向细胞核的易位。为了更好地研究p65的核和细胞质分布,从THP-1巨噬细胞中提取核和细胞质蛋白。结果显示,在转染WTAP过表达质粒的...
THP-1细胞因其特性,本身就很难转染,所以转染效率普遍偏低。但转染效率太低容易影响后续实验的进行,那么我们可以如何提高转染效率呢? 目前实验中THP-1转染使用较多的方法是:脂质体转染、腺病毒转染、慢病毒转染,其中病毒转染效率相较脂质体转染要高一些,但操作更繁琐、成本也更高。
THP-1细胞因其特性,本身就很难转染,所以转染效率普遍偏低。但转染效率太低容易影响后续实验的进行,那么我们可以如何提高转染效率呢? 目前实验中THP-1转染使用较多的方法是:脂质体转染、腺病毒转染、慢病毒转染,其中病毒转染效率相较脂质体转染要高一些,但操作更繁琐、成本也更高。 脂质体转染成本低廉,但细胞毒性较大...
THP-1细胞因其特性,本身就很难转染,所以转染效率普遍偏低。但转染效率太低容易影响后续实验的进行,那么我们可以如何提高转染效率呢? 目前实验中THP-1转染使用较多的方法是:脂质体转染、腺病毒转染、慢病毒转染,其中病毒转染效率相较脂质体转染要高一些,但操作更繁琐、成本也更高。
Lipofectamine® LTX 试剂是一种专有的无动物源性制剂,其细胞毒性较低,适用于将 DNA 转染到真核细胞中。本参考资料提供了使用 Lipofectamine® LTX 试剂(货号 15338-100)将质粒 DNA 转染至 THP-1 人单核细胞性白血病细胞(ATCC 货号 TIB-202)中的推荐步...