其实，这两种方法都是可以的，主要根据实验目的来选择。不过THP-1诱导为巨噬细胞后，不能继续传代增殖，所以如果需要大量细胞时，最好提前大量接种，然后再进行转染。但需要注意的是，无论采用哪种转染方法都会引起部分细胞死亡，因此培养时需要时刻注意THP-1细胞状态，诱导或转染时，最好使用处于对数生长期的细胞。不...
目前实验中THP-1转染使用较多的方法是:脂质体转染、腺病毒转染、慢病毒转染,其中病毒转染效率相较脂质体转染要高一些,但操作更繁琐、成本也更高。 脂质体转染成本低廉,但细胞毒性较大,细胞死亡率较高; 腺病毒转染可在对细胞损伤较小的情况下达较高水平,但可能对细胞免疫状态影响大; 慢病毒转染细胞毒性低,但其病...
进行THP-1细胞转染，即是将外源基因导入THP-1细胞的过程。这涉及到一系列步骤和技术操作，具体方法如下：一、转染流程简述 1. 准备细胞：确保THP-1细胞处于良好生长状态，并对其进行适当的分化诱导。2. 选择转染方法：根据目的基因大小和特性选择合适的转染方法，如电穿孔法、脂质体转染等。3. 制备转染...
使用Entranster-E电转液与指数衰减脉冲电转仪时THP-1细胞的电转染条件是: 对于0.2 cm电转杯,细胞密度为10x10^6 cells/ml,DNA用量为2μg,电转液体积为100μl,电压为140V, 电容为950μF。 对于0.4 cm电转杯,…
目前实验中THP-1转染使用较多的方法是:脂质体转染、腺病毒转染、慢病毒转染,其中病毒转染效率相较脂质体转染要高一些,但操作更繁琐、成本也更高。 脂质体转染成本低廉,但细胞毒性较大,细胞死亡率较高; 腺病毒转染可在对细胞损伤较小的情况下达较高水平,但可能对细胞免疫状态影响大; 慢病毒转染细胞毒性低,但其病...
THP-1细胞因其特性,本身就很难转染,所以转染效率普遍偏低。但转染效率太低容易影响后续实验的进行,那么我们可以如何提高转染效率呢? 目前实验中THP-1转染使用较多的方法是:脂质体转染、腺病毒转染、慢病毒转染,其中病毒转染效率相较脂质体转染要高一些,但操作更繁琐、成本也更高。
2.4 转染THP-1细胞系将获得的重组慢病毒转染THP-1细胞系，采用威尼德电穿孔仪进行电穿孔转染，以提高转染效率。转染后48小时，荧光显微镜观察并计算转染效率。通过嘌呤霉素筛选，建立FNDC5过表达的稳定转染细胞系。2.5 检测FNDC5表达情况将稳定转染的THP-1细胞系分为三组：空白组、空载组和FNDC5组。采用Western ...
THP-1细胞因其特性,本身就很难转染,所以转染效率普遍偏低。但转染效率太低容易影响后续实验的进行,那么我们可以如何提高转染效率呢? 目前实验中THP-1转染使用较多的方法是:脂质体转染、腺病毒转染、慢病毒转染,其中病毒转染效率相较脂质体转染要高一些,但操作更繁琐、成本也更高。
一、转染材料准备 1.转染试剂用量:10ul 2.siRNA浓度:20um/L 3.细胞密度:1*106-1*105 4.转染用培养板:6孔板 5.转染试剂:Advanced DNA RNA转染试剂;货号:AD600025 6.转染时间:48小时 7.细胞培养胎牛血清:Z7180FBS-500超低内毒素胎牛血清 8.细胞冻存液:L0100无血清细胞冻存液 ...
对于24孔培养板的THP1细胞转染实验，关键步骤如下：首先，确保细胞状态适宜，转染前一天，将细胞接种在每孔500微升无抗生素的培养基中，让细胞密度达到30-40%。其次，为siRNA和RFectSP的混合物做准备：取6 pmol siRNA用50微升无血清培养基稀释，然后取2微升RFectSP用同样量的无血清培养基稀释。轻轻混合...