摘要:目的探讨建立有效诱导THP-1细胞分化为破骨细胞样细胞的方法。方法 THP-1细胞首先在TPA的刺激下分化为贴壁细胞,然后在破骨细胞生成因子(RANKL)和巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)的联合诱导下向破骨细胞样细胞分化。通过抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色检测分化来的细胞是否为破骨细胞样细胞。结果 THP-1在RANKL和...
破骨细胞由单核细胞分化而来,在体外实验中,多采用外周血单核细胞(PBMCs)、脐带血单核细胞(UBMCs)和人类白血病单核细胞系U937和THP-1为前体细胞诱导得到破骨细胞样细胞。破骨细胞分化需要两个细胞因子——破骨细胞生成因子(RANKL)和巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)[1]。PBMCs和UBMCs直接在RANKL和M-CSF的诱导下...
方法THP一1细胞首先在TPA的刺激下分化为贴壁细胞,然后在破骨细胞生成因子(RANKL)和巨噬细胞集落刺激因子(M—CSF)的联合诱导下向破骨细胞样细胞分化。通过抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色检测分化来的细胞是否为破骨细胞样细胞。结果THP.1在RANKL和M—CSF的作用下分化为TRAP阳性的破骨细胞样细胞。结论RANKL和M—...
方法 THP-1细胞首先在TPA的刺激下分化为贴壁细胞,然后在破骨细胞生成因子(RANKL)和巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)的联合诱导下向破骨细胞样细胞分化。通过抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色检测分化来的细胞是否为破骨细胞样细胞。结果 THP-1在RANKL和M-CSF的作用下分化为TRAP阳性的破骨细胞样细胞。结论 RANKL和M-C...
诱导一 细胞向 破骨 细胞样细胞分化的研究 刘天云 天津医科大学口腔医院,天津 摘要:目的 探讨建立有效诱导 细胞分化为破骨细胞样细胞的方法。方法 一 细胞首先在的 刺激下分化为贴壁细胞,然后在破骨细胞生成因子和巨噬细胞集落刺激因 子 ? 的联合诱导下向破 骨细胞样细胞分化。通过抗酒石酸酸性磷酸酶染色检测...
M—CSF是一种造血细胞生 清洗 3次,晾干后使用。 长因子,在破骨细胞分化过程中,它的主要作用是上 1.2.3 诱导分化 将 THP1细胞 以1×10/ml的 调单核细胞 内 RANK的表达和支持细胞存 活。 密度接种到铺有玻璃片的48孔板 中,加入浓度为 1 RANKL和 M—CSF都 由间充质细胞和成骨细胞分 ×10mmol/L的...
取50mL THP-1或U937完全培养基,然后将成破骨诱导添加物 A 全部加入 THP-1 或 U937 完全培养基中。 轻轻颠倒摇晃配制好的成巨噬细胞诱导分化完全培养基,使其混合均匀。 成破骨诱导分化完全培养基液的配制方法 配制前将试剂盒中的成破骨诱导添加物 B 和成破骨诱导添加物 C 放置于 4℃冰箱内完全融化。
取50mLTHP-1或U937完全培养基,然后将成破骨诱导添加物 A 全部加入THP-1或U937完全培养基中。 轻轻颠倒摇晃配制好的成巨噬细胞诱导分化完全培养基,使其混合均匀。 成破骨诱导分化完全培养基液的配制方法 配制前将试剂盒中的成破骨诱导添加物 B 和成破骨诱导添加物 C 放置于 4℃冰箱内完全融化。
当THP-1 细胞融合度达到 80-90%时,收集细胞并计数; 使用37℃预热的成巨噬细胞诱导分化培养基重悬细胞,按照 5×105~1×106 cells/孔密度进行铺板,每孔加入 1mL 成巨噬细胞诱导分化培养基。 将细胞置于 37℃,5% CO2的培养箱中进行培养 48h。 48h 换液,换成 37℃预热的成破骨诱导分化培养基,每孔 1mL...
【摘要】目的 探讨建立有效诱导THP-1细胞分化为破骨细胞样细胞的方法.方法 THP-1细胞首先在TPA的刺激下分化为贴壁细胞,然后在破骨细胞生成因子(RANKL)和巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)的联合诱导下向破骨细胞样细胞分化.通过抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色检测分化来的细胞是否为破骨细胞样细胞.结果 THP-1在RANKL...