THP-1细胞为悬浮细胞且具有低密度依赖性,一般超过10^6/ml传代,比例一般为1:3/1:4,因此目前利用的两种传代方式: (1)半换液传代(不用离心):吸取培养瓶或者培养皿中的细胞移至新的培养瓶或者培养皿中,补足培养基2-3ml。 (2)传统的离心传代:将瓶子或皿中的细胞吸取至15mL离心管中,700-800rpm,离心5min;弃...
THP-1细胞培养注意事项 THP-1细胞悬浮圆形生长,偶有小聚团,属于正常现象,无需吹散;圆形透亮、细胞膜完整的细胞是活细胞,如果无法判断,可以取少量细胞用台盼蓝染色后计数确定细胞活率;少量细胞附着瓶底属于正常现象,可将悬浮细胞转移至新瓶,丢弃贴壁的细胞;THP-1喜欢偏酸环境,培养基呈橘色时可不用换液,...
THP-1细胞培养 THP-1是人急性单核细胞白血病细胞,是单核-巨噬细胞相关研究中的常用细胞系工具,可通过PMA(佛波酯)诱导分化为M0型巨噬细胞,然后根据实验需求进一步诱导为M1或M2型巨噬细胞。 细胞形态:悬浮细胞,圆形,大小均一,小而透亮(下图Fig1来自ATCC网站)。 注意:显微镜下观察之前,可以轻轻晃动培养瓶或孔板,静...
1. 补液法:培养基变黄时可补加适量(1~2mL)新鲜培养基,补加1-2次之后,用离心的方式全部换液,离心1200rpm (约250g)3分钟。2. 半换液法:以T25瓶子为例,瓶子里装有5mL培养基。竖起瓶子静置一段时间,待细胞沉底(以肉眼观察到沉底为限),小心吸出2.5mL的培养基,转移到离心管,离心1200rpm (约...
THP-1细胞为悬浮细胞且具有低密度依赖性,一般超过10^6/ml传代,比例一般为1:3/1:4,因此目前利用的两种传代方式: (1)半换液传代(不用离心):吸取培养瓶或者培养皿中的细胞移至新的培养瓶或者培养皿中,补足培养基2-3ml。 (2)传统的离心传代:将瓶子或皿中的细胞吸取至15mL离心管中,700-800rpm,离心5min;弃...
THP-1细胞有密度依赖性: THP-1细胞密度低时,生长较慢,培养密度维持在50万-100万细胞/毫升为宜;超过200万/毫升则需要传代。 THP-1细胞对血清要求高: 血清质量差异可能引起细胞状态变化,建议选用高质量的胎牛血清。选择品质好的血清更有利于THP-1细胞生长 ...
一、THP-1细胞的培养方法 1、细胞复苏 准备工作:15/50mL的离心管,马克笔,培养瓶(T25)/培养皿(直径60mm),RPMI1640培养基,胎牛血清(FBS),双抗(PS),酒精瓶(消毒杀菌) 酒精棉球,离心管/试剂管架子,移液枪,tip头(1000/200ul)。 (1)首先用酒精棉球擦拭细胞房的实验台子,将我们所需要上述物品放入台子里,并...
答:1.THP-1细胞培养过程中出现少量细胞贴壁属于正常情况,THP-1细胞被发现自发贴壁[3],可以轻吹收集细胞或者丢弃贴壁部分细胞;2.当贴壁细胞比例高于20%,建议排查细胞生长培养箱温度及CO2浓度、培养基成分(营养体系的酸碱性)、以及培养瓶可用非TC处理过的培养瓶,不利于细胞贴壁;3.更换血清可能会导致THP-1细胞...
气相条件:THP-1细胞需要在含有95%空气和5%二氧化碳(CO2)的混合气体环境中培养,以模拟细胞在体内的生长环境。温度与湿度:培养箱的温度应维持在37摄氏度,湿度通常保持在70%-80%,以确保细胞在最佳条件下生长。三、细胞传代与换液 传代方法:当THP-1细胞的密度达到80万/mL以上时,通常需要进行传代。传代时,...
细胞简介:THP-1细胞从一名1岁的患有急性单核细胞性白血病的男孩的外周血中分离建立,细胞可以吞噬乳胶颗粒和激活的红细胞,细胞膜和胞浆内均没有免疫球蛋白,表达C3R和FcR。THP-1细胞可受佛波酯、TPA诱导向单核系方向分化。THP-1细胞可以用于3D细胞培养、免疫系统紊乱、免疫学和毒理学研究,也是一种合适的转染宿主。