是适合细胞生长的,此时补液或半换液即可;2. THP-1细胞培养液中需添加β-巯基乙醇(细胞培养级别),若不添加,可能会对细胞状态造成影响;3. THP-1细胞比较难复苏,复苏初期细胞生长缓慢且会有部分细胞破碎,出现黑色细胞碎片,少量细胞碎片不影响细胞正常生长,待细胞恢复正常生长速度后可用半换液法稀释碎片。
换液时不要全培养基更换,传代时使用半换液法对细胞状态较为有利,因此我库建议您使用半换液法进行传代。6、THP-1细胞中需要添加β-巯基乙醇,现用现配,不可直接添加至完培中长期储存,会影响β-巯基乙醇的稳定性。7、细胞传代后细胞内出现黑色小点,细胞间隙内出现少量颗粒物或者培养基中浮游着少量死细胞等均...
若培养基中不添加β-巯基乙醇,长期培养细胞可能会出现大量贴壁,严重聚团等情况。THP-1 细 胞 换 液 方 法 离心换液法:1. 准备所需的培养基、离心管以及无菌枪头等;(培养基提前预热)2. 将所有细胞悬液转移至离心管中;3. 900-1000rpm,3min离心;4. 弃上清,加5mL PBS轻轻重悬细胞进行润洗,...
需要注意的是,THP-1细胞本身对血清比较敏感,所以我们采用的是价格比较贵的澳洲血清,培养基就是常用的RPMI1640培养基。 还有一点值得注意的是,这个细胞还需要添加β-巯基乙醇,β-巯基乙醇直接用的普诺赛细胞培养用的1000倍的储备液,使用时直接稀释1000倍加到培养基里就可以了。 培养方式 一般我是采用透气T25细胞培养...
THP-1细胞培养基里一定要加β-巯基乙醇吗:β-巯基乙醇是一种常用的培养补充剂,有抗氧化的作用,可减少氧化应激对THP-1细胞的影响。当细胞密度过大但需要维持时,可适当增加巯基乙醇的比例(不超过标准量的1.5倍)
THP-1 细胞喜欢温和处理,培养时尽量少离心,以减少对细胞的伤害。换液时不要全换,使用【半换液法】即可。 血清选择 🧪 细胞对血清质量敏感,建议使用进口大品牌优质血清进行培养。FBS不要灭活,若生长缓慢,可尝试其他FBS或暂时增加FBS浓度至20%。β-巯基乙醇的添加 🍶 培养液中需添加β-巯基乙醇(细胞培养级别)...
1) 准备RPMI-1640 培养基; 胎牛血清,10%;0.05 mM β-巯基乙醇(细胞培养级 推荐:iCell-8211);双抗,1%。 2) 参考传代比例:传代时控制细胞密度在2-4 ×105cell / mL,并在细胞生长至8-10 ×105cell / mL时进行传代。 3) 参考换液频率:传代时换液 ...
在某些细胞生长分裂的过程中,会向培养基中释放氧自由基。氧自由基积累到一定程度的时候,是有毒的,可以破坏细胞膜和细胞器膜,从而杀死细胞,使得细胞达不到很高的密度,从而干扰增殖实验的数据。加入β-巯基乙醇的作用是作为一种强还原剂,中和掉细胞培养基中积累的氧自由基,这样可以使得细胞分裂到...
一般THP-1 生长相当快,对于状态已经不好的情况,建议传代后3~4天再观察,一般4天时间培养基已明显泛黄,细胞数量巨增;1)THP-1细胞喜欢酸性条件,你不要老是换培养基。越酸的条件,细胞密度越大,细胞就长得越好;2)不要频繁换液,一般2-3次换液离心一次(只是补充培养基)3) 使用1640(ATCC推荐),注意加碳酸氢钠...
哦,我是按照细胞库的要求配的培养基:1640里面添加hepes、碳酸氢钠、2-巯基乙醇、丙酮酸钠,10%FCS,不过原来细胞库用的血清是进口的,而我回来后用的是杭州四季青的(经56度灭活补体),不知血清是否影响。 不知有没有正在养THP-1细胞的朋友,给点建议,THP-1是否真的很骄气?