今天为大家介绍2015年发表在Curr Protoc Protein Sci的一项实验技术——Thermal shift assay,可用于大规模筛选特定蛋白的配体。 蛋白质通常以native状态存在,加热会导致蛋白质转化为Denatured状态,暴露出疏水基团。暴露出的疏水基团可以与荧光染料SYPRO Orange相结合,从而提高荧光染料的发射光[1],于是可以通过检测荧光强度来...
CETSA技术基本原理 2013年瑞典卡罗琳斯卡(Karolinska)研究所开发了一种可以在体内检测药物与靶标蛋白结合强度的方法,即细胞热迁移技术(cell thermal shift assay, CETSA)技术。CETSA 技术,由体外热迁移技术(thermal shift assays, TSA)发展而来。 TSA 是基于蛋白质随着温度增加而逐渐变性的原理来表征蛋白质热稳定性的技术。
大多数药物是通过结合一个或多个蛋白质来影响其功能,这就产生了药物开发中的两个常规瓶颈:识别正确的靶蛋白,设计药物能够有效的寻找到并结合该蛋白。但是现在还没有方法能够有效且直接的测量药物分子到达并结合靶蛋白的方法。卡罗林斯卡研究中心科学家开发出一种称之为细胞热转移(CETSA,Cellular Thermal Shift Assay)的...
揭示生命机制的热力钥匙：Cellular Thermal Shift Assay（CETSA）的深度探索CETSA，这一生物物理技术的璀璨明珠，自2013年问世以来，以其独特的洞察力在细胞生物学领域崭露头角。它聚焦于药物与细胞内蛋白的互动，尤其在药物靶向性和脱靶效应的评估中发挥着关键作用。通过在不同温度下培育细胞与药物，CETSA揭...
绝大多数临床使用的抗疟药物都没有合理设计来干扰特定的分子靶标,而是根据它们在表型筛选中的强效抗疟特性鉴定。因此,在大多数情况下,对与这类药物的作用机制(MoAs)的理解仍然不清楚。在所有可用的抗疟疾药物中,除了青蒿素外,喹啉类...
PROTEOSTAT®Thermal shift 稳定性检测试剂盒内含有一种检测蛋白聚集的荧光染料,因此可用于监测系统热应力条件下的蛋白稳定性。通过 Thermal shift 分析,可轻松确定大部分蛋白的聚集温度。聚集温度是蛋白稳定性的指标,可用于优化使蛋白聚集最小化的条件,以及鉴定与目标蛋白结合并赋予结构稳定性的配体。配合使用相关的 PRO...
测量检测shift热漂移assayShiftAssay 系统标签: shiftassaythermal漂移proteinhepes Danuta Maksel, Protein Crystallography Unit, Department of Biochemistry and Molecular Biology Thermal Shift Assay: Monitoring solution-dependent changes in protein stability Principle: Thermodynamic stability of a protein is related ...
Fluorescence-based Thermal Shift Assay The fluorescence-based thermal shift assay is a recently adapted means to perform affinity screening based on a well-known theory. Theory behind the assay: Ligand binding to a target protein can stabilize a protein's native state, as shown in the increase ...
Cellular Thermal Shift Assay，缩写：CETSA）这个技术的大神啊？？请教这个技术的原理和优缺点。对分子...