Tet-off系统：1992年由Gossen等人针对TetR与TetO元件率先开发的、应用于哺乳动物的基因表达调控系统。Tet-off系统包含两个部分结构，第一部分是将TetR与单纯疱疹病毒VP16的转录激活结构域融合，得到可由Tet控制的转录激活因子（tTA）；第二部分是Tet反应启动子（Ptet），这是将TetO序列融合到缺乏增强子序列的最小启动子...
Tet-off型四环素阻遏系统的工作原理与Tet-on型四环素诱导系统正好相反，无四环素时 基因表达，四环素存在时基因关闭。Tet转录活化因子(tetracycline transcriptional activator, tTA)是由TetR的1-207个氨基酸和单纯疱疹病毒VP16激活结构域的C端127个氨基酸组成。VP16的增加使得TetR由转录抑制因子变为转录激活因子。生理条件下...
Tet（四环素）是一种用于诱导基因表达的调控系统，是在大肠杆菌Tn10转座子中特异的Tet抗性操纵子基础上建立起来的。其包括抑制型系统Tet-off和激活型系统Tet-on，其中后者由前者演化而来。Tet-off基因调控表达系统由调节表达载体和反应表达载体两部分组成，调节表达载体含有启动Tet转录活化因子（tetracycline transcriptional...
在发育和病理研究中,Veron等建立了“Tet-on”诱导的肾小球足细胞血管内皮生长因子164(Podocyte VEGF164)过表达转基因小鼠,并利用其研究Podocyte VEGF164在发育的各个时期与肾脏病变的关系;在神经系统基本研究中,Blesch等在大鼠的阿尔兹海默症模型动物中利用“Tet-off”系统控制神经生长因子(NGF)的表达,实现了在大脑疾病...
为了实现这种时间特异性表达,我们需要用到Tet-off系统。今天,我们就来详细讲解一下Tet-off系统的原理和组成。🌿 Tet-off系统的核心组件: TetR:这是一种转录抑制因子,能够结合DNA和四环素。 TetO:这是Tet操纵子,可以与TetR蛋白结合,从而调控基因表达。
一、Tet-Off系统的基本原理 Tet-Off系统是以大肠杆菌Tn10转座子上的四环素抗性操纵子为基础建立的。该系统主要涉及到两个组成部分:四环素控制的转录因子(tTA)和Tet-op启动子。当tTA与Tet-op启动子结合时,系统开始发挥作用,驱动靶基因的表达或抑制。在没有诱导药物存在的情...
TET-on系统是通过引入外源TET蛋白来激活特定基因的表达，而TET-off系统则是通过抑制TET蛋白的活性来关闭特定基因的表达。TET-on系统的工作机制是，当需要激活某个基因的表达时，可以通过病毒载体将TET蛋白导入目标细胞中，这样就能促进目标基因的表达。TET-off系统则是利用反义寡核苷酸（ASO）或特定的抑制...
Tet-off调控系统: Tet转录活化因子(tetracycline transcriptional activator, tTA)是由TetR的1-207个氨基酸和单纯疱疹病毒VP16激活结构域的C端127个氨基酸组成。VP16的增加使得TetR由转录抑制因子变为转录激活因子。生理条件下,tTA主动与TRE结合,启动基因表达;若给于DOX后,DOX与tTA的结合体与TRE解离,从而抑制基因表达。
在发育与病理研究中，Veron等人使用“Tet-on”系统在小鼠中过表达肾小球足细胞血管内皮生长因子164，研究其与肾脏病变的关系。Blesch等人在阿尔兹海默症模型中使用“Tet-off”系统调控神经生长因子表达，实现大脑疾病模型中对神经营养因子的调控。Susumu Tonegawa等人结合光遗传学、化学遗传学和钙成像技术，揭示...
Tet-Off 系统:四环素可防止 tTA 转录因子在启动子处结合 DNA。在四环素存在下,基因表达受到抑制。 Tet-On 系统:四环素结合 rtTA 转录因子,并允许其在启动子处结合 DNA,在四环素存在下诱导基因表达。 Tet技术起源: Tet技术由海德堡大学的 H. Bujard教授及其同事开发的,专利归Tet Systems Holding GmbH & Co. KG(...