(上标 Tet-on)细胞,在强力霉素的作用下,用RT-PCR及Western blot法鉴定重组质粒的表达.结果 扩增出HIF-1α的cDNA测序结果与Genbank记载完全一致,并成功克隆入P(上标 TRE2hyg),将反应质粒P(上标 TRE-HIF-1α)转入HepG2(上标 Tet-on)细胞,可以完整有效表达HIF-1α且受强力霉素的调控.结论 成功克隆和构建携带...
目的 克隆和构建携带人低氧诱导因子-1α(HIF-1α)的Tet-on基因表达系统反应质粒PTRE-HIF-1α。方法 以缺氧的肝癌细胞株HepG2总RNA为模板,进行RT-巢式PCR,获得HIF-1α的cDNA,克隆入Tet-on基因表达系统反应质粒PTRE2hyg,酶切重组子鉴定。将构建好的PTRE-HIF-1α用脂质体法转入HepG2Tet-on细胞,在强力霉素...
单质粒tet-on系统的构建、细胞验证及转基因小鼠模型的建立
Tet-on circRNA Expression Vector质粒结构收到产品后,请先根据产品管壁标签来判断产品形式,并在扩增前准确查找该质粒的抗性、感受态和培养温度。 1、质粒干粉(请务必转化挑单克隆重提后使用) ①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min,再加入20μl 无菌水溶解质粒; ②取2μl质粒加至100μl 感受态中,冰浴30min后...
李高鹏。【摘要】 目的 克隆和构建携带人低氧诱导因子一1a(HlF-1a)的Tet-on基因表达系统反应质粒P僻“删4。方法以缺氧的肝癌细胞株HepG2总RNA为模板,进行RT-巢式PCR,获得HIF-la的cDNA,克隆入Tet-on基因表达系统反应质粒P”￡2h,酶切重组子鉴定。将构建好的PTR。mM。用脂质体法转人HepG2h”“细......
ClassifiedIndex:Confidential(yes/no):noCode:10224N0.1005319DissertationfortheMasterDegreeTheConstructionandCellularVerificationofSingle—PlasmidTet—onSystem,andEstablishmentofTransgenicMiceModelCandidate:MaZhuoSupervisor:Prof.XuLiDegreeCategory:MasterofAgricultureCollege:AnimalScienceandTechnologyFirstleveldiscipline:Animal...
pLVX-Tet-On-Advanced质粒序列是一个大肠杆菌表达载体,Tac强启动子可以驱动GST促溶标签和目的基因融合表达,LacI阻碍蛋白和Laco操作子使本质粒在没有加入IPTG之前禁止表达,防止其影响细菌生长。表达后的融合蛋白可用凝血酶蛋白酶切割,再过一次GST柱子即可清除掉GST标签。 产品相册pLVX-Tet-On-Advanced质粒序列CTTTCCTGCGTT...
单质粒Tet-on系统的构建、细胞验证及转基因小鼠模型的建立.pdf,目录 摘要 英文摘要 1 前言1 1.1 本课题研究背景及理论依据1 1.2 四环素调控系统的概述3 1.2.1 四环素调控系统的作用机制3 1.2.2 四环素调控系统的特点5 1.2.3 四环素基因表达调控系统的研究新进展6 1.
Tet-on基因表达系统反应质粒P TRE-HIF-1α的构建和表达鉴定
目的 克隆和构建携带人低氧诱导因子-1α(HIF-1α)的Tet-on基因表达系统反应质粒PTRE-HIF-1α。方法 以缺氧的肝癌细胞株HepG2总RNA为模板,进行RT-巢式PCR,获得HIF-1α的cDNA,克隆入Tet-on基因表达系统反应质粒PTRE2hyg,酶切重组子鉴定。将构建好的PTRE-HIF-1α用脂质体法转入HepG2Tet-on细胞,在强力霉素...