3、在一些实施例中,所述制备方法还包括:用肿瘤抗原特异性tcr慢病毒感染所述特异性靶向sars-cov-2抗原的tcr-t细胞,得到同时特异性靶向sars-cov-2抗原和肿瘤抗原的tcr-t细胞。 4、在一些实施例中,所述方法还包括:敲除所述同时特异性靶向sars-cov-2抗原和肿瘤抗原的tcr-t细胞中的b2m基因,得到敲除b2m基因的同时特异性...
本发明还提供了所述的tcr-t细胞的制备方法,其包括:将识别肿瘤抗原的tcr的核苷酸序列的一个或多个导入到t细胞中进行表达,构建所述tcr-t细胞。 优选地,所述识别肿瘤抗原的tcr的鉴定步骤如下:通过流式分选、磁珠分离或肿瘤组织原位测序方法,由肿瘤组织获得表达了识别肿瘤抗原cd4t细胞的标志物tnfrsf18、cxcl13、tnfrsf4...
将针对治疗不同类型肿瘤的car通过慢病毒感染上述分离到的tcr与hla双基因敲除的t细胞,其具体过程为:leader-scfv-cd8-cd137-cd3ζ-t2a-hsv-tk核苷酸合成,将合成的leader-scfv-cd8-cd137-cd3ζ-t2a-hsv-tk的基因片段插入到plent-c-gfp载体noti-asisi位点,经测序正确后,构建成质粒,将所述质粒转染293t细胞,包装成携...
1、tcr-t细胞疗法,即细胞受体基因工程改造的t细胞疗法,是向正常外周血淋巴细胞上导入已知的抗原特异性tcr(t cell receptor)基因而进行治疗的一种疗法。普通t细胞中引入新的基因,使得改造过的t细胞能够表达有效识别肿瘤细胞的tcr,从而引导t细胞特异性杀死肿瘤细胞。tcr是t细胞表面的特异性受体,是高度多样化的异源二聚体,...
本发明还提供了所述靶细胞tcc-3t3的制备方法,包括以下步骤:1)用连接肽将caveolin-1基因和caspase-3基因连接获得caveolin-1和caspase-3的融合蛋白基因;2)用慢病毒转染法将所述caveolin-1和caspase-3的融合蛋白基因转入小鼠成纤维样细胞获得表达融合蛋白的cc-3t3细胞;3)慢病毒转染法将tcr-t细胞靶抗原基因和hla基因转...
进一步可选的,所述cas9mrna和所述tcr基因的sgrna的质量比为1:3。 本发明第一方面提供的tcr敲除的靶向ny-eso-1的t细胞受体基因修饰t细胞的制备方法,通过敲除t淋巴细胞上的tcr基因,并制备靶向ny-eso-1的t细胞受体,得到tcr敲除的靶向ny-eso-1的t细胞受体基因修饰t细胞。本发明所述制备方法制备的tcr敲除的靶向ny-eso...