TaqMan探针设计的基本原则是什么? 答:下列原则供您参考。 ◆TaqMan探针位置尽可能靠近扩增引物(扩增产物50-150bp),但不能与引物重叠。 ◆长度一般为18-40mer。 ◆G-C含量控制在40-80%左右。 ◆避免连续相同碱基的出现,特别是要避免GGGG或更多G出现。 ◆在引物的5’端避免使用G。 ◆选用比较多的碱基C。 ◆...
二、TaqMan探针设计原则 特异性:探针的特异性是设计过程中最重要的原则之一。探针应与目标序列完全互补配对,避免与其他非目标序列产生交叉反应。因此,在设计探针前,应对目标序列进行充分的分析和比对,确保探针的特异性。长度:探针的长度通常在20-30个碱基之间。较短的探针可能降低特异性,而较长的探针则可能影响杂...
Taqman探针的设计原则 探针的长度与结构 长度 通常为20-30bp,确保特异性并减少非特异性扩增。结构 由报告基团、淬灭基团和连接臂组成,连接臂长度一般为5-6个脱氧核糖核苷酸。探针的特异性 针对目标序列 确保探针与目标序列完全匹配,避免交叉反应。序列选择 选择基因特异性区域,避免基因组中的高变区。探针的荧光...
Taqman引物探针设计原则讲解, 视频播放量 1640、弹幕量 0、点赞数 15、投硬币枚数 0、收藏人数 57、转发人数 12, 视频作者 亲爱的华-研发工程师, 作者简介 可有偿提供技术服务,可私信➕V,某重点大学生物专业硕士毕业,目前任某生物科技公司研发工程师,相关视频:Primer
探针设计原则:1、 先选择好探针,然后设计引物使其尽可能的靠近探针;2、 探针长度应在 15-45bp (最好是 20-30bp) ,以保证结合特异性;3、检测探针的DNA折叠和二级结构;尽量避开二级结构;3、 Tm值在65-70 C,通常 14、比引物 TM值高5-10 C (至少要5C),以确保在退火过程中探针 先于引物与目的片段结合,...
关于探针设计的基本原则正确是( )。A.探针要绝对的保守,有时分型就仅仅依靠探针来决定。理论上又一个碱基不配对,就可能检测不出来。B.TaqMan探针的长度最好在20-40bp之间,确保探针的Tm值要比引物的Tm值高出5-10摄氏度,这样可保证引物延伸时探针完全与模板片段结合。C.探针5'端不能含有G,因为即使探针被酶降解...
实时荧光定量PCR——TaqMan探针法及设计原则课件
Taqman探针、引物设计原则 与普通PCR反应相比,荧光定量PCR在反应中加入了荧光物质,用以实时显示反应的进程,Taqman探针法在普通PCR反应体系中加入了与扩增片段互补的一段带荧光标记的核酸序列,SybrGreen法加入了能与双链核酸结合的荧光染料,这些荧光物质都能影响Taq酶的活性进而影响PCR反应的效率。 在Taqman探针法中,Taq...
两种定量分析方法的比较及Taqman探针引物设计原则两种定量分析方法的比较及Taqman探针、引物设计原则遗传物质DNA首先要把所携带的遗传信息转录成为信使RNA(mRNA),携带遗传信息的mRNA从细胞核进入到细胞质中与核糖体结合,在核糖体中mRNA携带的遗传信息被翻译成为多肽,多肽经过进一步加工后变成蛋白质,至此遗传撞朝关覆昭薛父...