Applied Biosystems TaqMan 5' 核酸酶测定化合物为获得 SNP 基因分型结果提供了一种快速简单的方法。我们众多产品系列中的每种预设计 TaqMan SNP 基因分型和 DME 测定都包括两种等位基因特异性 TaqMan MGB 探针,这些探针含有不同...
Taqman-MGB探针法SNP分型|SNP基因分型 1 服务介绍 相关服务与产品 技术文章 文档下载 技术原理:以SNP分型检测为例,在PCR过程中,两个探针能与正向引物和反向引物之间的互补序列特异退火结合。当探针以完整形式存在时,由于能量共振转移,荧光基团只发出微弱荧光。特异的探针与相应的等位基因杂交后,DNA聚合酶发挥5’外切...
TaqMan-MGB探针SNP分型法由于其特异性强,操作简单,结果易判读,因此在分子诊断产品设计开发中被大量使用。
利用PCR体系检测0.5ng/µL检测限参考品,PCR结果均与已知基因型别完全一致。 五、总结 荧光定量PCR是分子生物学非常基础的实验。无论你是刚读研究生的小白,还是初入职场的生物民工,掌握和熟练运用荧光定量PCR知识都是必须的。TaqMan-MGB探针SNP分型法由于其特异性强,操作简单,结果易判读,因此在分子诊断产品设计开发...
该技术是由ABI研发的SNP分型技术,其技术原理如下:PCR反应时,加入一对两端有不同荧光标记的MGB特异探针来识别不同等位基因(allele1和allele2),5’端为报告荧光基团(reporter),3’端为淬灭荧光基团(quencher)。PCR过程中,两个探针能与正向引物和反向引物之间的互补序列特异退火结合。当探针以完整形式存在时,由于能量...
特异的探针与相应的等位基因杂合后,DNA聚合酶发挥5’到3’外切酶活性,把报告荧光基团切割下来,脱离了3’端淬灭荧光基团的淬灭作用 (quench),从而发出荧光。两个探针的5’端标有不同的荧光 (FAM或VIC),3’端标有MGB 淬灭基团结合体。根据检测到的不同荧光,可以判断相应的样本的SNP 等位基因型。
Applied Biosystems TaqMan SNP 基因分型分析试剂盒使用 TaqMan 5´核酸酶化学试剂扩增和检测纯化基因组 DNA 样品中的特定多态性。每项测定可对个体进行单核苷酸多态性 (SNP) 基因分型,包括两个序列特异性引物和两个 TaqMan 小沟结合物 (MGB) 探针以及非荧光淬灭剂 (NFQ)。一个探针标记有 VIC 染料,以检测等位...
5.区分SNP的碱基应当位于探针中间1/3的位置去(将探针平分三段,SNP位于中间那段)。如果这段位置不合适,设计不出优秀的探针,可以将SNP位置向3’端挪动,以更加靠近MGB基团。不要将SNP分型位点安排到最后的三个核苷酸中。 6.由于G核苷酸形成高级结构及对荧光团的淬灭特性,探针的G残基数量不宜超过C的数量,如果有此情...
探针识别:通过Taqman探针对SNP进行检测,针对每一个SNP位点,需同时设计野生型等位基因和突变型等位基因分型探针,探针标记不同荧光基团,如FAM、TET等,可在一管中实现等位基因检测。通常采用探针更短的MGB探针以提高探针特异性。该方法特异性强,简单方便,非常适合SNP...
方法选择X染色体上的13个SNP位点(X-SNP),针对每个位点分别设计1对PCR引物和TaqMan探针,进行实时荧光PCR扩增,对X-SNP位点进行分型.结果 13个位点均符合Hardy-Weinberg平衡;多态信息含量分布为0.3497～0.3750,杂合度为0.453 7～0.502 1.建立的方法能够用于X-SNP位点的基因分型,检测结果与DNA测序结果完全一致.结论 ...