BHQ淬灭剂就像一个黑洞,本身不产生荧光,并且能够将一定范围内报告基团发出的荧光信号全部吸收,解决qPCR实验体系中光污染的问题,通过降低本底信号提高荧光信号的信噪比。 MGB探针 MGB探针是双标记探针,在TaqMan探针的基础进行优化改进,其中3’端包含一个能够插入DNA小沟的结合物(Minor Groove Binder,MGB),可以增加探针的熔...
Applied Biosystems TaqMan QSY 探针是用于实时荧光定量 PCR 的双标记探针。TaqMan QSY 探针可为多重 qPCR 实验提供卓越的灵敏度和性能。诸如黑洞淬灭基团(Black Hole Quencher,以下简称 BHQ™)的暗淬灭探针的用户可以设计自定义 QSY 探针,而无需更改探针序列。
BHQ淬灭剂就像一个黑洞,本身不产生荧光,并且能够将一定范围内报告基团发出的荧光信号全部吸收,解决qPCR实验体系中光污染的问题,通过降低本底信号提高荧光信号的信噪比。 2. MGB探针(Minor Groove Binder) 淬灭范围:390-625 nm 探针长度更短、特异性更强 适用于SNP分型检测 MGB探针是双标记探针,在TaqMan探针的基础进行...
长度更短、特异性更强的探针 非荧光淬灭基团(NFQ)可最大程度地提高灵敏度 可与FAM、VIC、NED、TET染料一起使用 了解更多信息:定制MGB探针 定制QSY和QSY2 qPCR探针 多重检测最多可检测6个靶标 可以轻松转换BHQ/Iowa Black 探针序列 QSY探针用于多重检测,最多...
为了使PRSSV多重检测分辨率提高,研发人员引入了ZEN™️型双淬灭探针,即5'FAM/ZEN/3'IBFQ探针,与普通的单淬灭探针相比,可有效降低假阳性,减少背景荧光。如图8所示,利用18碱基的5'FAM修饰的qPCR探针对长度为120 bp PRRSV区域进行检测,其中B11和B12(红色)代表5'FAM/3'BHQ单淬灭探针,A7和A9(蓝色)代表5'FAM...
基本原理 TaqMan探针是一种寡核苷酸探针,其5’端携带荧光报告基团(如FAM、TET、VIC、HEX等),3’端携带荧光淬灭基团(如TAMRA、BHQ等)。在PCR扩增过程中,除加入一对特异性引物外,还加入一个与靶序列完全互补的TaqMan探针。当探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收,因此检测不到荧光信号。随着PCR的进行...
常用的荧光基团包括FAM、HEX等,淬灭基团则推荐使用黑洞系列(BHQ)。 4.软件辅助设计:推荐使用ABI公司的PrimerExpress等软件进行探针设计,这些软件能够综合考虑Tm值、发夹结构、二聚体等因素,提高设计效率和质量。 5.实验验证:设计完成后,需通过实验验证探针的特异性和灵敏度,确保满足实验需求。 四、总结 Taqman探针的设...
为了使PRSSV多重检测分辨率提高,研发人员引入了ZEN™️型双淬灭探针,即5'FAM/ZEN/3'IBFQ探针,与普通的单淬灭探针相比,可有效降低假阳性,减少背景荧光。如图8所示,利用18碱基的5'FAM修饰的qPCR探针对长度为120 bp PRRSV区域进行检测,其中B11和B12(红色)代表5'FAM/3'BHQ单淬灭探针,A7和A9(蓝色)代表5'FAM...
根据荧光基团的种类进行淬灭基团的搭配。早期的淬灭基团多为TAMRA或者DABYCL,但TAMRA自身也会发出荧光干扰检测,而DABYCL的淬灭范围非常有限,极大地限制了Taqman探针的使用。目前淬灭基团最常用的是Biosearch Technologies公司的黑洞系列淬灭基团(Black Hole Quencher,BHQ)。