SYBR Green 预混液 TaqMan 检测试剂盒 TaqMan 预混液 * 取决于模板质量和引物/设计优化。 图1:基于 TaqMan 和基于 SYBR Green 的检测工作流程比较。 TaqMan 方法 背景 最初,使用嵌入式染料进行实时荧光PCR产物定量。但这些染料存在重大缺点,即会同时检测特异性以及非特异...
1、荧光染料法（SYBR Green）：SYBR Green Ⅰ是荧光定量PCR中最常用的荧光染料，它能与所有的双链DNA...
1、 DNA结合染料—SYBR Green I 法 • 原理:SYBR Green I 是一种DNA结合染料,其与双链DNA结合后,荧光大大增强,DNA与染料结合所释放的荧光量与dsDNA的数量成正比。因此,检测到的荧光信号可反映出PCR体系存在的双链DNA数量。 • 特征:可逆荧光,最大吸收波长497nm,最大发射波长520nm。 • 适用情况:非特异...
答:荧光染料SYBR GreenⅠ和TaqMan荧光探针的荧光信号强度代表了模板DNA的拷贝数,但有不同。 (1)原理不同 ①SYBR荧光染料 SYBR荧光染料激发光波长520nm,将SYBR荧光染料混合在PCR液中,只有与双链DNA结合后,才能发射荧光信号,以保证荧光信号的增加与PCR产物的增加完全同步。 ②TaqMan荧光探针 TaqMan荧光探针是与靶DNA序...
在qPCR技术中，TaqMan探针法和SYBR Green染色法是两种广泛应用的方法。TaqMan探针法通过特异性探针识别目标序列，具有较高的特异性和准确性。而SYBR Green染色法则通过荧光染料标记双链DNA，具有操作简便的优势。尽管SYBR Green染色法在操作上较为简单，但在特异性上不如TaqMan探针法。这是因为SYBR Green染色...
实时荧光定量PCR (Quantitative Real-time PCR)是一种在DNA扩增反应中,以荧光化学物质测每次聚合酶链式反应(PCR)循环后产物总量的方法。通过内参或者外参法对待测样品中的特定DNA序列进行定量分析的方法。· Real-timePCR是在PCR扩增过程中,通过荧光信号,对PCR进程进
1、 DNA结合染料—SYBR Green I 法 • 原理:SYBR Green I 是一种DNA结合染料,其与双链DNA结合后,荧光大大增强,DNA与染料结合所释放的荧光量与dsDNA的数量成正比。因此,检测到的荧光信号可反映出PCR体系存在的双链DNA数量。 • 特征:可逆荧光,最大吸收波长497nm,最大发射波长520nm。
SYBR Green Ⅰ染料法因具有使用简便,价格便宜等优点而被广泛使用。但其缺点是缺乏特异性,即染料可以与任何dsDNA结合。因此,qPCR反应中有非特异性扩增产物的出现会增加荧光值,影响定量结果的准确性,而TaqMan探针法的出现解决了染料法非特异性的问题。下面,我们一起来了解一下TaqMan 探针法qPCR。
SYBR GreenⅠ染料鹅源星状病毒(goose astrovirus, GoAstV)是国内新发雏鹅痛风病病原,为更好地应用于临床检测,本试验针对GoAstV分别建立了基于TaqMan探针和SYBR GreenⅠ染料的2种实时荧光定量PCR方法,并比较两者的优劣.首先根据GoAstV的ORF1b基因保守序列设计特异性引物和探针,通过优化反应条件和反应体系,分别建立...