整个实验过程分为三大块:引物设计、DNA提取和PCR、产物纯化回收测序。引物设计是电脑上干的活,质量最稳定也最容易控制。干生物的DNA提取是需要闭着眼睛就能搞定的事,切胶回收测序就更不在话下了。 五是应用广泛,适合高通量分析。Tail-PCR最多的用来对插入突变中插入位点的分析,从而寻找到与谋突变表型相关的基因,...
现在要检测水稻转基因的插入位点,希望用tail pcr的方法检测,但不知道怎么样设计引物,特异性引物是针对...
2。以pSH75质粒的两端设计TAIL-PCR引物,有哪位能帮忙设计一下啊,或者提供一写经验。不胜感激!
TAIL-PCR,即交错式热不对称PCR技术可以用于克隆已知序列的侧翼未知序列,其基本原理是利用目标序列附近的已知序列设计3个嵌套的特异引物(SP1、SP2、SP3),利用它们和另一端的随机简并引物(AD)在不同的退火温度下选择性地扩增目标片段,退火温度高时,需要引物与模板之间有较长的互补配对序列才能相互配对,特异性强。AD是...
拟南芥突变时salk突变体库的,插入的载体为PROKII,求几个用过的比较好用的嵌套引物,谢谢 ...
你可以用谷歌搜索tail-pcr,有很多文献可以参考,不过现在不怎么用tail-pcr来扩增已知序列的侧翼序列,...
本人刚接触tail-pcr, 已知一段DNA序列,如何设计三条特异引物呢?设计的时候有什么需要注意的吗?谢谢...
2。以pSH75质粒的两端设计TAIL-PCR引物,有哪位能帮忙设计一下啊,或者提供一写经验。不胜感激!