SYBR Green I是一种高灵敏的DNA荧光染料,结合于所有dsDNA双螺旋小沟区域,游离时荧光微弱,与双链DNA结合后荧光增强,最大吸收波长约为497nm,发射波长最大约为520nm,适用于各种电泳分析。 SYBR Green的定义与背景 SYBR Green I,作为一种高效的DNA荧光染料,被广泛应用于分子生物学研究中。它...
一.SYBR Green I法原理 1.Sybr Green I是一种结合于小沟中的双链DNA结合染料,在PCR反应体系中,Sybr荧光染料特异性地掺入DNA双链与双链DNA结合后,发射荧光信号,而不掺入双链中的Sybr染料分子不会发射任何荧光信号。从而保证与PCR产物的增加完全同步。 2.利用荧光染料可以指示双链DNA熔点的性质,通过熔点曲线分析...
Sybr Green I的定量检测原理是:在Sybr Green I染料的体系中,双链DNA和Sybr Green I结合之后,会使染料发出一种特殊的荧光,当基因发生复制时,双链DNA会越来越多,Sybr Green I染料中结合的双链DNA会越来越多,随之形成新的染料-DNA复合物,同时使荧光发射强度增加。最终,通过荧光定量仪记录荧光的强度,就可以获得目的...
SYBR Green,又名SYBR Green I,是一种荧光染料,正是因为它,才使得Real-Time PCR能够实现定量检测,取得了极大的成功。 二、SYBR Green荧光染料的原理 SYBR Green是一种荧光染料,可以被用于Real-Time PCR技术,并能反映在PCR过程中特定DNA基序列扩增的变化。SYBR Green染料是一种可被氨基酸体系吸收的荧光染料,可以在...
工作原理:1.步骤、过程1)当SYBR Green I染料被加入到样品中后,它可立即与样品中的双链DNA进行结合 。2)在PCR过程中,Applied Biosystems AmpliTaq Gold DNA聚合酶可对目标序列进行扩增,以产生PCR产物,即“扩增子”。3)随后,SYBR Green I染料会与每一个新产生的双链DNA分子进行结合。4)随着PCR的进行,越来越多...
qPCR染料法的原理 qPCR染料法在体系中额外加入了非特异性双链DNA荧光染料(通常为SYBR Green I),游离的荧光染料本身不发光或只发出极弱的荧光信号,但染料可以非特异地结合在双链DNA小沟上,并发出较强的荧光信号。随着PCR循环数的增加,越来越多的染料与双链DNA结合,产生的荧光量与双链DNA含量成正比。因此可以通过检...
1、 DNA结合染料—SYBR Green I 法 • 原理:SYBR Green I 是一种DNA结合染料,其与双链DNA结合后,荧光大大增强,DNA与染料结合所释放的荧光量与dsDNA的数量成正比。因此,检测到的荧光信号可反映出PCR体系存在的双链DNA数量。 • 特征:可逆荧光,最大吸收波长497nm,最大发射波长520nm。
SYBR Green I方法是目前最为常见的荧光染料,其作用原理为:SYBR Green I是一种只与双链DNA小沟结合的染料,并不与单链DNA链结合,而且在游离状态不发出荧光,只有掺入DNA双链中才可以发光,因此,在PCR体系中,随着特异性PCR产物的指数扩增,每个循环的延伸阶段,染料掺入双链DNA中,其荧光信号强度与PCR产物的数量呈正相...