SYBR Green I是一种高灵敏的DNA荧光染料,结合于所有dsDNA双螺旋小沟区域,游离时荧光微弱,与双链DNA结合后荧光增强,最大吸收波长约为497nm,发射波长最大约为520nm,适用于各种电泳分析。 SYBR Green的定义与背景 SYBR Green I,作为一种高效的DNA荧光染料,被广泛应用于分子生物学研究中。它...
SybrGreen是一种常用于荧光实验中的染料,其原理是通过与DNA结合来发射荧光信号。SybrGreen染料属于靶向DNA结合的染料,能够与DNA的双链结构结合形成复合物,从而发射荧光信号。 SybrGreen的结构是一种孔雀石绿类似物,含有孔雀石绿的三苯基甲烷和二甲基氨基吡啶结构。其对DNA结合的特异性通过与DNA之间的静电相互作用、氢键...
一.SYBR Green I法原理 1.Sybr Green I是一种结合于小沟中的双链DNA结合染料,在PCR反应体系中,Sybr荧光染料特异性地掺入DNA双链与双链DNA结合后,发射荧光信号,而不掺入双链中的Sybr染料分子不会发射任何荧光信号。从而保证与PCR产物的增加完全同步。 2.利用荧光染料可以指示双链DNA熔点的性质,通过熔点曲线分析...
工作原理:1.步骤、过程1)当SYBR Green I染料被加入到样品中后,它可立即与样品中的双链DNA进行结合 。2)在PCR过程中,Applied Biosystems AmpliTaq Gold DNA聚合酶可对目标序列进行扩增,以产生PCR产物,即“扩增子”。3)随后,SYBR Green I染料会与每一个新产生的双链DNA分子进行结合。4)随着PCR的进行,越来越多...
qPCR染料法的原理 qPCR染料法在体系中额外加入了非特异性双链DNA荧光染料(通常为SYBR Green I),游离的荧光染料本身不发光或只发出极弱的荧光信号,但染料可以非特异地结合在双链DNA小沟上,并发出较强的荧光信号。随着PCR循环数的增加,越来越多的染料与双链DNA结合,产生的荧光量与双链DNA含量成正比。因此可以通过检...
SYBR Green I方法是目前最为常见的荧光染料,其作用原理为:SYBR Green I是一种只与双链DNA小沟结合的染料,并不与单链DNA链结合,而且在游离状态不发出荧光,只有掺入DNA双链中才可以发光,因此,在PCR体系中,随着特异性PCR产物的指数扩增,每个循环的延伸阶段,染料掺入双链DNA中,其荧光信号强度与PCR产物的数量呈正相...
Sybr Green I的定量检测原理是:在Sybr Green I染料的体系中,双链DNA和Sybr Green I结合之后,会使染料发出一种特殊的荧光,当基因发生复制时,双链DNA会越来越多,Sybr Green I染料中结合的双链DNA会越来越多,随之形成新的染料-DNA复合物,同时使荧光发射强度增加。最终,通过荧光定量仪记录荧光的强度,就可以获得目的...
一、SybrGreen荧光染料的原理 SybrGreen是一种结构简单的荧光染料,其分子中含有一个芳香环和一对氮碱基。当SybrGreen与DNA结合时,其芳香环可以穿过DNA的双螺旋结构,而氮碱基可以与DNA的碱基配对形成氢键。这种结合使得SybrGreen的荧光受到DNA的影响而发生变化。 二、SybrGreen荧光染料在实验中的应用 1. DNA凝胶电泳实...