(1) siRNA呈很轻的干膜状附在管壁上,打开管子前先高速离心,然后再慢慢打开管盖,溶解时请加足量 DEPCH2O后盖上管盖,震荡溶解。(2) 为避免外界因素(包括酶,极端pH或者温度条件等)导致产品降解,所有操作请严格遵循RNA操作规则。实验过程中,产品最好于冰上放置,使用完毕后请于-20°C~-80°C小心保存。(...
(3)siRNA具有高特异性 siRNA只能沉默同源基因,而无关基因不受影响,且在siRNA序列中配对的19~21nt中仅需改变一个核苷酸,就可使该siRNA消除靶基因的沉默效应。(4)siRNA具有多功能性 siRNA可以通过序列设计靶向不同的靶基因,因此siRNA可治疗各种疾病。(5)siRNA易于合成,生产成本低 siRNA化学合成简单,且与蛋...
其中 siRNA 是一类长度为 21 ~ 23 nt 的dsRNA,由 RNase III 家族成员 Dicer 酶在细胞质中分解长的 dsRNA 而产生。siRNA 首先在细胞质内与Argonaute(Ago)蛋白结合形成 RNA 诱导沉默复合物(RNA-induced silencing complex,RISC),随后...
siRNA 是一类人工合成的双链 RNA--由正义链及反义链组成,其长度通常为 21nt,反义链通过与 mRNA 完全互补配对,进而降解 mRNA 发挥其转录后调控功能。siRNA 在细胞中降解 mRNA 的机制与 miRNA 类似,如 Fig.1 所示,合成的 siRNA 通过胞吞作用进入细胞中,随后少量的 siRNA 能够发生溶酶体逃逸进入细胞质,进入细胞...
siRNA是与靶基因互补的长度为21-25nt的小片段双链RNA。目前,siRNA技术已经成为研究和治疗各种疾病的重要工具,包括癌症、病毒感染、遗传性疾病等。同时,siRNA技术也在不断发展,如引入化学修饰、载体等改进措施,以提高siRNA的稳定性和生物活性。》1998年,由Andrew Fire和Craig Mello等科学家发现,他们发现双链RNA(...
siRNA通常是一段21nt的核酸序列,从统计学上说,21nt的序列重复出现的可能性极低。RNAi属于转录后基因沉默,有高度的序列特异性,siRNA是严格按照碱基互补配对原则与靶mRNA结合的,因此只降解同源的mRNA,由于其高特异性,不会降解与目的mRNA非同源的其他mRNA,从而实现...
一般来说,siRNA序列长度在19~29 nt之间,针对具体的序列而言,最好为AA+(N n)UU(N代表任意碱基;n为碱基数目),其次是 NA(N n) UU和NA(N n) NN。研究表明siRNA在21nt 、27nt、29nt,结果表面21nt相比27nt对靶基因的最大抑制率更容易达到(不过具体的实验,还是应该结合具体的情况而定,因此在设计引物的时候...
siRNA储存常规化学合成的siRNA序列为21~23nt的双链小分子RNA,为冻干粉形式的即用型试剂 ,在常温不溶解的情况下可以保存至少1个月时间,放置于-20℃~-80℃低温环境中,冻干粉可以稳定保存一年。02- 转染试剂储存4℃保存,不可冷冻。03-体外转染操作流程:第一步、接种细胞:建议提前一天接种细胞,接种...
siRNA指一类长约21-23nt(从文献报道看,19-25nt都是可以的)的双链RNA分子,一般3’端有两个游离的碱基,通过RNA干扰途径沉默目标基因。 2.siRNA介导的RNA干扰机制是什么? RNAi首先将较长的双链 RNA 加工和切割成 siRNA(可以直接体外合成siRNA),通常在每条链的 3'末端带有 2 个核苷酸突出端,负责这种加工的酶是...
siRNA 是一类人工合成的双链 RNA--由正义链及反义链组成,其长度通常为 21nt,反义链通过与 mRNA 完全互补配对,进而降解 mRNA 发挥其转录后调控功能。siRNA 在细胞中降解 mRNA 的机制与 miRNA 类似,如 Fig.1 所示,合成的 siRNA 通过胞吞作用进入细胞中,随后少量的 siRNA 能够发生溶酶体逃逸进入细胞质,进入细胞...