SgRNA - Cas9 载体的构建是 CRISPR/Cas9 基因编辑技术的关键步骤之一。 首先,需要设计合适的 sgRNA。sgRNA 是由一个特定的支架序列和一个与目标基因互补的 20 个核苷酸左右的序列组成。通过在线工具或软件,可以根据目标基因的序列设计出有效的 sgRNA。设计时需要考虑多个因素,如 sgRNA 的特异性、效率以及避免脱靶效应...
pLV3-U6-MCS-sgRNA-Neo质粒载体价格:￥680/支产品详情: 价格:680 元/支 品牌:KEMOBio 产地:国内 Cas9 sgRNA vector质粒载体价格:￥680/支产品详情: 价格:680 元/支 品牌:KEMOBio 产地:国内 载体相关产品报价 产品标题价格产地公司名称更新日期 shRNA载体构建 | 载体构建电议武汉武汉金开瑞生物工程有限公司2024...
昨天和今天 昨天我依照golden gate assembly的方法,参照了张峰老师实验室protocol,使用了BbsI限制性内切酶和T4连接酶,将合成好的sgRNA插入到带有Cas9的质粒中;接着转化到感受态细胞中--复苏感受态细胞后--涂氨苄西林平板过夜培养--今天傍晚挑取单克隆菌落置于氨苄西林+LB培养基中过夜培养,明日即可提取质粒并酶切验证。但...
由于最常用的含有Cas9的质粒的大小比较大,将sgRNA或sgRNA文库构建到Cas9/sgRNA表达载体中可能很麻烦。NEB开发了一个解决这个问题的方案,使用单链DNA寡核苷酸、限制性内切酶消化载体和NEBuilder HiFi DNA进行组装。 protocol: 1.查找所需目标序列中的PAM序列(NGG)。可以使用网页CHOPCHOP (uib.no) 示例:5“CGAAGAACCTC...
3.克隆SqRNA和sgRNA scaffold到Cas9载体上 PCR扩增:使用带有适当限制性酶切位点或同源重组尾部的引物，...
质粒名称: Cas9 sgRNA vector 出品公司: 爱迪基因 目录编号: 68463 存储实验室: Su-Chun Zhang 载体骨架基本信息 载体名称: gRNA cloning vector (Addgene plasmid #41824) 载体出品公司: -- 载体抗性: 卡那霉素 空载体大小: 3900 bp 完整质粒大小: -- 载体修饰: 一个先前描述的嵌合引导RNA表达盒被排序为...
CRISPR KI donor 载体 载体大小 4.5 kb 左侧克隆位点 Hind Ⅲ、Sph Ⅰ、Sal Ⅰ 右侧克隆位点 Mlu Ⅰ、Kpn Ⅰ、EcoR Ⅰ 产品规格 10 μg/支 载体示意图 2.sgRNA-Puro/mCherry病毒载体等 产品介绍 CRISPR/Cas9 sgRNA病毒载体是慢病毒系统质粒,可直接转染或通过包装病毒感染细胞。该质粒含有gRNA骨架结构及两种标...
科学家为了让Cas蛋白定向剪切DNA序列,在CRISPR工作机理的基础上,人为重组了一段目的基因的sgRNA(small-guide RNA),在sgRNA的引导下,Cas9蛋白可以实现对目的基因的定向切割。本文主要介绍,目的基因sgRNA设计和如何将sgRNA构建到CRISPR-Cas相关载体。 “ 1. 目的基因sgRNA设计...
在CRISPR/Cas9基因组编辑技术中,一个sgRNA只能靶向基因的一个位点,有时基因敲除的效率并不高。为了提高敲除效率,来自浙江大学生命科学学院的研究人员在Golden-Gate克隆技术的基础上,研发了一种新方法,与其他构建多重sgRNA载体的方法相比,这一方法具有快速、高效等优点,同时研究得到的5个突变体为后续的IAA2功能研究提供...
快速构建配对sgRNA的Cas9双元表达载体文库的方法专利信息由爱企查专利频道提供,快速构建配对sgRNA的Cas9双元表达载体文库的方法说明:本发明公开了一种快速构建配对sgRNA的Cas9双元表达载体文库的方法,涉及基因工程领域中快速...专利查询请上爱企查