5d later, cell assay: WB/ RT-qPCR to check expression level “CRISPR系统除了用来做基因敲除,是否还有其它的应用呢?” “当然,除了敲除基因,CRISPR还可以用来激活基因。” 如何利用CRISPR系统来激活基因? sgRNA的基因定位功能简直不要太好,而即便让Cas9的“剪刀”突变了,Cas9依然能和sgRNA结合。既然如此,不妨在...
GeneAce Probe qPCR Mix II 品牌:Nippon Gene Whatman 滤膜 10463862 UNIFLO 13/0.45 RC 500/PK Wakopak Wakosil 7SIL-120 4.0*300mm 硅胶柱Wakopak Wakosil 7SIL-120 品牌:Wako Alpha橙皮苷酶[原核生物] Alpha-Rhamnosidase (prokaryote) 货号:252 品牌: ...
[0022] 二)本发明通过RT‑qPCR表明本发明所构建的hnRNPA3基因敲除细胞系感染鸭坦布 苏病毒(TMUV)后较亲代鸭胚成纤维细胞中病毒基因组水平更高,说明敲除hnRNPA3基因的 细胞系能够显著提高鸭坦布苏病毒(TMUV)的扩增水平;利用TMUV翻译系统表明hnRNPA3基 因敲除细胞系能够促进TMUV基因组的翻译,有利于研究hnRNPA3...
查看详情 一步法RT-qPCR试剂盒 SYBR绿色荧光定量试剂(One Step rt-qpcr Kit) ￥175.00查看详情 DNA建库试剂盒(Hieff NGS® dna Library Prep Kit) ￥2755.00 查看详情 磁珠法土壤/粪便DNA提取试剂盒 MolPure® Mag Soil/Stool dna Kit ￥605.00
3.RT-qPCR 本工作采用 (Invitrogen;Thermo Fisher Scientific,Inc.)提取总RNA,用RevertAid First Strand cDNA Synthesis Kit(Noveprotein,Suzhou,China)将总RNA反转录为cDNA。qPCR采用ABI 7500RT-qPCR体系,反应液为20μL。2 -ΔΔCt 法计算基因相对表达量,以GAPDH为内参基因。ESCCAL-1的引物序列为:ESCCAL-1-F:...
inhibitor(20U)中,溶液置于qPCR仪 器中进行荧光值分析,52℃反应30min,每分钟收集一次FAM通道的荧光值,通过荧光增量= Rn‑Rn计算不同sgRNA的荧光增量。 Cycle30Cycle1 [0130]表6 [0131] [0132]测试结果如表6所示,在同样RNA样本浓度条件下sgRNA sgRNA‑OT2‑T2和sgRNA‑ ...
MIQE: minimum information for RT–qPCR experiments. Rights and permissions Reprints and permissions About this article Cite this article Reis, A.C., Halper, S.M., Vezeau, G.E. et al. Simultaneous repression of multiple bacterial genes using nonrepetitive extra-long sgRNA arrays. Nat Biotechnol...
(RT‑RAA)、 环介导恒温扩增(RT‑LAMP)和超分支滚环扩增(HRCA)恒温扩增方法中任一种; [0011] 所述免疫试纸条含有显色物质、基因探针以及两条检测线;所述显色物质选自胶 体金、四氧化三铁、碳点、纳米硒、量子点和荧光分子中的任一种;两条所述检测线分别固定 有与所述标记分子1和所述标记分子2结合的...
结果如图1,WesternBlot和RT-qPCR的结果显示BHK-sgHS3ST5-42-KD中的HS3ST5蛋白和mRNA水平显著下降,表明敲降HS3ST5的BHK-21重组细胞系建立成功。随后从重组细胞系中挑出50个单克隆细胞株铺至12孔板,收取样品后,利用WesternBlot和RT-qPCR检测重组单克隆BHK-21细胞内的HS3ST5蛋白和mRNA表达水平。 图2所示的为BHK-...
第一方面,本发明提供了一种用于敲除人CYP2E1基因的sgRNA序列,所述sgRNA的靶DNA序列为SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2所示序列中的至少一条。 第二方面,本发明提供了一种敲除人胚胎肾脏细胞CYP2E1基因的方法,为利用CRISPR/Cas系统在人胚胎肾脏细胞中对CYP2E1基因进行改造,具体包括如下步骤: ...