SEC-HPLC(尺寸排阻高效液相色谱)是一种基于分子大小分离的HPLC技术。它利用具有不同孔径的固定相(填料)对样品中的蛋白质进行分离,使得大分子先于小分子通过色谱柱,从而实现蛋白质的分离和纯度分析。 二、HPLC蛋白纯度分析原理 HPLC蛋白纯度分析的原理基于蛋白质在移动相(溶剂)中通过固定相(色谱柱填料)时的相对迁移速率。
SEC-HPLC是一种常用的蛋白质纯度检测方法,通过分析蛋白质样品在凝胶柱中的分离情况可以评估样品的纯度。在进行SEC-HPLC检测时,需要准备好合适的设备和试剂,进行样品制备和注射,设置合适的流动相条件和检测器参数,最后进行数据分析和结果解释。发布于 2025-03-07 10:13・北京 ...
三种分析的结果比较如下图所示,可以看出非还原 CE-SDS的多聚体含量分析结果显著低于常规 SEC-HPLC,但与变性SEC-HPLC的分析结果基本一致。多聚体为共价和非共价结合两种形式总和,而在 CE-SDS分析的情况下,由于去垢剂SDS的存在,非共价形式的多聚体被解离成为单体,所以多聚体的含量相比常规 SEC-HPLC明显降低。在变性...
抗体纯度测定主要面临两方面挑战：有效分离抗体分子与杂质及对主蛋白与杂质的高灵敏检测。紫外、荧光、电化学及质谱等检测器常用于此，为确保结果的准确性，通常采用两种分离方法。SEC-HPLC（凝胶排阻高效液相色谱）和CE-SDS（凝胶电泳-十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳）是两种常用的分析手段，它们在抗体大小...
- HPLC纯度(分子筛) - SEC-MALS分子量 SEC-MALS原理 SEC:尺寸排阻色谱法;有时称为GPC/GFC,即凝胶渗透色谱法或凝胶过滤色谱法。 GPC/SEC是根据不同的分子具有不同的流体体积而进行分离,而不是根据分子的分子量大小。色谱柱中填充了表面具有很多小孔的填料颗粒。当样品分子随流动相一起流经填料时,尺寸较小的分...
最近在做蛋白纯度分析，用的是hplc-sec,出峰拖尾，峰型不对称 @wyy080214 @学术巨星@klicking发自...
- HPLC纯度(分子筛) - SEC-MALS分子量 SEC-MALS原理 SEC:尺寸排阻色谱法;有时称为GPC/GFC,即凝胶渗透色谱法或凝胶过滤色谱法。 GPC/SEC是根据不同的分子具有不同的流体体积而进行分离,而不是根据分子的分子量大小。色谱柱中填充了表面具有很多小孔的填料颗粒。当样品分子随流动相一起流经填料时,尺寸较小的分...
- HPLC纯度(分子筛) - SEC-MALS分子量 SEC-MALS原理 SEC:尺寸排阻色谱法;有时称为GPC/GFC,即凝胶渗透色谱法或凝胶过滤色谱法。 GPC/SEC是根据不同的分子具有不同的流体体积而进行分离,而不是根据分子的分子量大小。色谱柱中填充了表面具有很多小孔的填料颗粒。当样品分子随流动相一起流经填料时,尺寸较小的分...