一般在20-50min。根据需要设置洗脱梯度,常为0-100%的缓冲液梯度。
五、HPLC纯度检测样本处理过程(SEC-HPLC) 1.系统平衡:使用与样品稀释相同的缓冲液,平衡SEC-HPLC系统,直到基线稳定。 2.加载样品:通过自动进样器或手动方式,将准备好的样品加载到色谱系统中。 3.洗脱和检测:以恒定的流速通过色谱柱,蛋白质将根据其大小依次洗脱,并通过检测器(通常为紫外检测器)记录洗脱曲线。 六、...
高效SEC-HPLC是一种可靠、准确的蛋白质纯度检测方法，对于生物药物研发和质量控制具有重要意义。通过优化和改进SEC-HPLC方法，我们可以提高蛋白质纯度分析的准确性和灵敏度，为蛋白质研究和生物药物开发提供可靠的数据支持。在进行高效SEC-HPLC分析时，科研人员应综合考虑样品特性和实验要求，并遵循最佳实践指南以确保结果的...
将样品注入SEC-HPLC系统中,一般使用自动进样器进行注射。注射量要根据柱的尺寸和样品浓度来确定,通常在10-100 μL之间。 5.流动相条件: 设置合适的流动相条件,包括流速、缓冲盐浓度、pH值等。这些条件需要根据样品的特性和柱的要求来确定。一般来说,流速在0.5-1 mL/min之间,缓冲盐浓度在10-100 mM之间,pH值在...
总结起来就是,在大小异质性的聚体分析上常规 SEC-HPLC分析比 CE-SDS分析更加客观;在大小异质性的片段分析上CE-SDS分析比常规SEC-HPLC更准确。 参考文献 1.人源化抗VEGF单克隆抗体制品的大小异质性分析
·样品要求 - 总量:>300ug - 状态:无色澄清液体/白色固体 - 纯度:>95% ·交付内容 - HPLC纯度(反相) - HPLC纯度(分子筛) - SEC-MALS分子量 SEC-MALS原理 SEC:尺寸排阻色谱法;有时称为GPC/GFC,即凝胶渗透色谱法或凝胶过滤色谱法。 GPC/SEC是根据不同的分子具有不同的流体体积而进行分离,而不是根据分子...
SEC-HPLC法测定溶瘤腺病毒注射液的纯度 药物分析杂志
使分析结果更加客观。对于片段分析，非还原CE-SDS能更准确地检测到降解片段，表明SEC-HPLC的分辨率较低，难以有效分离单体及大部分片段。综上所述，SEC-HPLC在多聚体分析上更为客观，而CE-SDS在片段分析上更准确。两种方法各有优劣，使用时需综合考虑，以获得更全面的抗体纯度信息。
方法:利用sEc—HPLc法建立检测rHuPH20纯度的方法,并对方法的专属性、线性、精密度(重复性和中间精密度)、检测限、定量限和耐用性等指标进行评估。结果:空白溶剂在设定的积分范围内无特异峰出现;样品浓度为30～480斗...文档格式:PDF | 页数:4 | 浏览次数:228 | 上传日期:2016-10-21 16:47:17 | 文档星级:...