重组人生长激素 (recombinant human growth hormone,rhGH) 主要用于治疗儿童及成人身材矮小,发育迟缓等病症。rhGHFc免疫融合蛋白是将rhGH基因与特异位点突变后的人抗体IgG4 Fc段用柔性linker连接,利用CHO-k1细胞进行表达。 本应用中作者采用了尺寸排阻色谱柱TSKgel G2000SWXL建立了测定重组人生长激素Fc免疫融合蛋白含量[1...
HPLC法检测蛋白含量的关键在于被检测蛋白与其他干扰物质之间是否具有良好的分离度,本方法选择SEC-HPLC是基于人血白蛋白与CN10蛋白之间存在着3倍的分子质量差异,因此采用SEC-HPLC可使两者之间易于分离,而且实验条件也较为简单。本方法所采用的含量测定溶液配制2.22.2.1对照品溶液用移液器精密量取CN10标准品6mL,加入...
在变性 SEC-HPLC分析的情况下,由于SDS的存在,多聚体含量则与非还原CE-SDS的分析结果基本一致。所以与非还原 CE-SDS相比, SEC-HPLC可更加客观地评价样品中总多聚体的百分比含量。该研究分析的单抗样品多聚体主要是以非共价键的形式连接,所以应注意两种方法所得到的多聚体含量结果具有不同的含义,在分析多聚体含量...
不同体积的分子以不同程度渗入固定相孔隙内 如需了解关于安捷伦 SEC 生物色谱柱的更多信息,请访问 www.agilent.com/chem/bioHPLC 3 体积排阻色谱法适用于分离和定量蛋白质混合物,因此是重组 蛋白生产过程中的一种重要质控手段.包括测定聚集体(二聚 体,三聚体,四聚体等)以及从较大分子量的蛋白质中分离低 分子...
SEC分析是下游加工中的标准方法,用于通过重组生产治疗性蛋白质和抗体来确定生物制造期间靶分子的纯度和聚集状态。 确定分子量间的差异来检测污染物和聚合物是基于高纯洗脱液的使用,高纯洗脱液不会与固相发生任何反应。 SEC所需特殊质量的水可以从各个制造商处购买,或者直接使用arium®pro VF等实验室纯化水系统在现场...
通过高效液相色谱法(HPLC)建立一种测定CN10冻干品中蛋白含量的方法。以0.1 mol/L TrisHCl、0.1 moL/L NaCl、pH 7.2缓冲液作为流动相,色谱柱为TSK2000SWxl(4.6 mm×250 mm)凝胶过滤色谱柱,体积流量为0.65 mL/min,进样体积50μL,检测波长选择280 nm,依据HPLC外标法原理建立CN10含量测定方法,并根据《生物制品...
Waters超宽孔径SEC-HPLC检测质粒DNA, mRNA, LNP聚集体 #HPLC##重组蛋白##CDMO# 注:本文不构成任何投资意见和建议,以官方/公司公告为准;本文仅作医疗健康相关药物介绍,非治疗方案推荐(若涉及),不代表耀海生物立场。任何文章转载需得到授权。 长文预警!全文共3800字,阅读15分钟。
SEC-HPLC法测定CN10冻干品中CN10的蛋白含量琳*梁凌宇,高雪峰,应莲芳,张轶,杨军,蒋(兰州生物制品研究所有限责任公司甘肃省疫苗工程技术研究中心,甘肃兰州730046)摘要通过高效液相色谱法(HPLC)建立一种测定CN10冻干品中蛋白含量的方法。以0.1mol/LTris-HCl、0.1moL/LNaCl、pH7.2缓冲液作为流动相,色谱柱为TSK2000SWxl...
摘要: 目的:测定重组人组织型纤溶酶原激活剂改构体(combinant human mutant-threonine mutant-asparagine mutant-lysine tissue type plasminogen activator,rhTNK-tPA)单链含量.方法:将样品用二硫苏糖醇(DTT)打开二硫键,采用分子排阻色谱(size-exclusion high performance liquid chromatograph,SEC-HPLC)法测定.色谱柱:...
腺相关病毒(adeno-associated virus, AAV)是微小病毒科(Parvoviridae)家族的成员之一,一般,研究中采用的重组腺相关病毒载体(Recombination adeno-associated virus, rAAV)是在非致病的野生型AAV基础上改造而成的基因载体,由于其种类多样、免疫原性极低、安全性高、宿主细胞范围广、扩散能力强、体内表达基因时间长等,rA...