本法相当于一个简化的内标法, 同时也是对杂质对照品外标法的简化, 即在研究方法学时, 利用杂质对照品和主成分对照品, 分别测定杂质和主成分的线性方程, 以斜率之比计算杂质相对于主成分的校正因子, 此校正因子可直接载入质量标准中, 在常规检验时用以校正该杂质的实测峰面积。在实际测定时, 可采用相对保留时间...
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HPLC的检测和定量方法 HPLC的检测通常基于分析物的特定物理化学特性。检测器能够将这种特性转化为电信号或检测器响应,并通过色谱图表现出来。检测器产生的电信号强度以对应于每个化合物的色谱峰形式出现,通常用于定量。 该信号(响应)取决于进入检测器并产生色谱峰的分析物的瞬时浓度。使用色谱图中的峰面积是最常见的定...
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高效液相色谱法(HPLC)是在经典的液相色谱法基础上不断发展结合起来的,其以液体可以作为企业流动相,并采用不同颗粒极细的高效固定相的柱色谱进行分离控制技术。其分离管理机制与常规柱色谱条件相同,但填料更加需要精细,需高压泵推动,柱效高,分析处理速度快。
建立了同时测定猪肉中四环素族、氯霉素和克伦特罗的固相萃取-高效液相色谱(SPE-HPLC)测定方法,采用Oasis HLB固相萃取柱净化萃取,Diamonsil TM C18色谱柱分离,磷酸盐缓冲液(pH至2.5)-乙腈梯度洗脱,检测波长245 nm。结果表明:该测定方法对土霉素、四环素、金霉素、氯霉素和克伦特罗测定的线性范围均为2~12μg/ml,基底加...
高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography,简称HPLC)是一种常用的分离、定性和定量分析技术,广泛应用于化学、制药、食品和环境等领域。以下是如何使用HPLC检测计算纯度的具体步骤和要点: 一、样品准备 首先,需要将待检测的样品进行适当的预处理,包括溶解、过滤和稀释等步骤,以确保样品能够适应HPLC系统的...
采用体积排阻色谱法 (SEC)对生物大分子进行有效分离,是近些年发展起来的现代分析分离技术,其优点为分离效能、灵敏度高,速度快,且对蛋白质等生物大分子的分离通常能保 持其天然构象和生物活性.同时,SEC对于样品前处理要求相对简单.本研究又用SEC技术分离甲基硒代半胱氨酸以及硒代蛋氨酸,并将之与离子对色谱法进行 ...
HPLC法测定济川养生驻颜不老方药酒中芦荟大黄素和大黄素的含量 袁学刚1,杨向东1,张郭莺1,胡慧玲2,高飞2,盛菲亚2,王战军3,包希福3 [摘要] 目的:测定济川养生驻颜不老方药酒中芦荟大黄素和大黄素的含量。方法:色谱柱为Ultimate XB C18(250 mm×4.6 mm,5.0 μm);流动相为乙腈-0.2%甲酸水溶液(75:25,V/V);...
HPLC方法开发中的色谱柱挑选 在HPLC方法开发过程中,选择合适的色谱柱是一个至关重要的环节。以下是选择色谱柱时需要考虑的关键因素: 1.分离模式:首先,必须根据待分离物质的特性选择合适的分离模式,例如反相色谱、正相色谱、亲水相互作用、离子交换和尺寸排阻等。举例来说,对于非极性或弱极性的有机化合物,反相色谱柱...