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实验用品(溶液配制说明详见文章下方)蛋白样品,SDS-PAGE loading buffer,PBS,Tris-Hcl (PH 8.8), Tris-Hcl (PH 6.8) ,30%丙烯酰胺,10%SDS,10%过硫酸,5×SDS-PAGE电泳缓冲液,考马斯亮蓝R-250染色液,脱色液。实验步骤一、凝胶配置1.分离胶的配制(1)找出配套的胶板,用擦镜纸擦干净,并固定...
0.5mol/L Tris-HCl(pH6.8);1.5mol/L Tris-HCl(pH8.8);10%SDS(十二烷基硫酸钠);10%过硫酸铵;30%丙烯酰胺(W/V);TEMED(四甲基乙二胺);5×上样缓冲液;考马斯亮蓝染色液;电极缓冲液;脱色液。 三、实验步骤 1.准备 将两块玻璃板对齐后,放入1mm硅夹条中,垂直放于架子上。 2.分离胶的配制,以12%分离...
一、实验目的 掌握蛋白类药物SDS-PAGE法检测分子量和纯度的原理和方法。二、实验原理 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(简称SDS-PAGE),也叫变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,是以聚丙烯酰胺凝胶作为支持介质的一种含有蛋白变性剂SDS(十二烷基硫酸钠)的常用电泳技术,常用于检测蛋白质。聚丙烯酰胺凝胶是由一定量的丙烯酰胺和甲叉双丙烯...
一、实验目的 掌握蛋白类药物SDS-PAGE法检测分子量和纯度的原理和方法。 二、实验原理 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(简称SDS-PAGE),也叫变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,是以聚丙烯酰胺凝胶作为支持介质的一种含有蛋白变性剂SDS(十二烷基硫酸钠)的常用电泳技术,常用于检测蛋白质。
实验原理 SDS-PAGE电泳是由SDS(十二烷基硫酸钠)和还原试剂将蛋白分子解聚后因亚基的大小不同,在恒定PH(碱基)缓冲系统中对其进行分离。 SDS是一种阴离子去污剂,它能将分子内和分子间的氢键断裂,使蛋白质分子去折叠,破坏蛋白质分子的二级和三级结构。此外,强还原剂,如β-巯基乙醇、二硫苏糖醇(DTT)能使半胱氨酸残...
四、实验步骤 1.配液:根据用量,按照《附录:SDS-PAGE法检测分子量试剂配方》进行配制。 2.制胶 由于本实验目的蛋白约66±7kD,故选用10%分离胶。 垂直电泳槽的玻璃板清洗干净后,将凹型玻璃与平玻璃重叠,将两块玻璃板放入电泳槽支架内(短玻璃朝里),并将电泳槽支架在桌面水平轻轻磕几下,使玻璃板底部对齐,然后...
一、实验目的 掌握蛋白类药物SDS-PAGE法检测分子量和纯度的原理和方法。 二、实验原理 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(简称SDS-PAGE),也叫变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,是以聚丙烯酰胺凝胶作为支持介质的一种含有蛋白变性剂SDS(十二烷基硫酸钠)的常用电泳技术,常用于检测蛋白质。
sds-page实验实验一SDS-PAGE凝胶电泳 1、实验目的 通过SDS-PAGE凝胶电泳,将待测蛋白质与标准Marker对比,粗略得到未知蛋白相对分子质量。 二、实验药品 主要试剂药品 凝胶储液 5.002ml 丙烯酰胺 30g 甲叉双丙烯酰胺 0.8g tris 272.3g HCl AP 3g 甘氨酸 144.2g SDS 15g dH2O TEMED 21.67ul 乙醇 750ml (分析纯...
SDS-PAGE实验报告 引言: SDS-PAGE(聚丙烯酰胺凝胶电泳)是一种常用的蛋白质分离和分析技术。通过SDS(十二烷基硫酸钠)的作用,可以使蛋白质在电泳过程中带有负电荷,从而使其按照分子量大小在凝胶上进行分离。本实验旨在通过SDS-PAGE技术分离和分析不同来源的蛋白质样品,探究其分子量和纯度。 材料与方法: 1. 样品制备...