🔬 配制步骤: 将1.25mL 1M Tris-HCl、0.5g SDS、25mg BPB和2.5mL甘油混合在10mL塑料离心管中。 加入去离子水,搅拌至完全溶解,然后定容至5mL。 将混合物分装成500μl的小份,室温保存。 使用前,向每小份中加入25μl的2-ME,并搅拌均匀。 加入2-ME的Loading Buffer可以在室温下保存一个月左右。📝 注意事...
5×SDS-PAGE Loading Buffer配制方法 组份浓度: 250mMTris-HCl(pH6.8) 10%(W/V)SDS 0.5%(W/V)BPB(溴酚兰) 50%(V/V)甘油 5%(W/V)β-巯基乙醇 配制量:5mL 配制方法: 1.量取下列试剂,置于10mL塑料离心管中。 1MTris-HCl1.25mL SDS0.5g BPB25mg 甘油2.5mL 2.加入去离子水溶解后定容至5mL。 3....
另:Takara公司Catalog-N5上的5×SDS－PAGE Loading Buffer配方：组分浓度：配制量5 ml 配制方法 1．称量下列试剂置于10ml塑料离心管中。2．加去离子水溶解后定容至5 ml。3．小份（500 ul/份）分装后于室温保存。4．使用前将25 ul的2-ME加到每小份中。5．加入2-ME的Loading Buffer可在室温下保存一个月左右...
相关试剂配置说明一、3×SDS-PAGE loading buffer的配制1、将除BPB以外的药品完全溶解。SDS常温下很难溶解，可以在37℃水浴溶解。完全溶解后，再加入BPB，进行溶解；2、把溶好的buffer分装到1.5ml的离心管中，1ml/管，常温放置；3、使用前，每管加入30µL巯基乙醇。注意事项：巯基乙醇为危险品，加入的过程在通...
SDS-PAGE loading buffer一般配成2X浓度，而非5X，因为5X的buffer过于粘稠，并且SDS在低温下难以溶解于水中，这使得配制的buffer显得非常稠厚，难以摇匀。如果你需要配制大量的buffer，特别是5X的buffer，这可能并不实际。此类试剂的用量通常较少，建议你仅配制少量，例如10毫升。下面以配制2X loading buffer...
将收集的各样品加入等体积的 2×SDS-PAGE Loading Buffer,煮沸裂解 5min,冰浴 2min,12,000rpm 离心 10min,取上清-20℃保存备用。 SDS-PAGE 蛋白质电泳(参照分子克隆实验指南操作)(萨姆布鲁克,2002) 1)按照电泳装置的使用说明,装好洁净干燥的玻璃板。
我想说以下几点:1.SDS-PAGE loading buffer一般配成2X 的,5X loading buffer确实过于粘稠,且SDS在低温下难溶于水,这就导致你配的buffer“摇都摇不动”了2.不知你为何要配那么多loading buffer(况且是5X的),这些东西都是用量很少的,建议你少配些,比如……10 ml?3.以下就以2X loading buffer(配制10 ml)为...
加入卩-巯基乙醇的上样Buffer可以在室温下保存一个月左右。5xSDSLoadingBuffer的配制(方案二):(10ml)(本方案摘自蛋白质技术手册汪家政、范明)组分:Tr 3、is-HCIpH6.8(60mM);SDS(2%);溴酚兰(0.1%);甘油(25%);卩-巯基乙醇(14.4mM)配制过程:量取1MTris-HCI(pH6.8)0.6ml;50%的甘油5ml;10%的SDS溶液2ml;1%...