🔬 配制步骤: 将1.25mL 1M Tris-HCl、0.5g SDS、25mg BPB和2.5mL甘油混合在10mL塑料离心管中。 加入去离子水,搅拌至完全溶解,然后定容至5mL。 将混合物分装成500μl的小份,室温保存。 使用前,向每小份中加入25μl的2-ME,并搅拌均匀。 加入2-ME的Loading Buffer可以在室温下保存一个月左右。📝 注意事...
5×SDS-PAGE Loading Buffer配制方法 组份浓度: 250mMTris-HCl(pH6.8) 10%(W/V)SDS 0.5%(W/V)BPB(溴酚兰) 50%(V/V)甘油 5%(W/V)β-巯基乙醇 配制量:5mL 配制方法: 1.量取下列试剂,置于10mL塑料离心管中。 1MTris-HCl1.25mL SDS0.5g BPB25mg 甘油2.5mL 2.加入去离子水溶解后定容至5mL。 3....
将收集的各样品加入等体积的2×SDS-PAGE Loading Buffer,煮沸裂解5min,冰浴2min,12,000rpm离心10min,取上清-20℃保存备用。 1)按照电泳装置的使用说明,装好洁净干燥的玻璃板。 2)分离胶的制备 按下列成分配制10mL 12%分离胶: 各成分加入后迅速旋涡混匀,用微量移液器将其小心地注入准备好的玻璃板间隙中,并为...
另:Takara公司Catalog-N5上的5×SDS－PAGE Loading Buffer配方：组分浓度：配制量5 ml 配制方法 1．称量下列试剂置于10ml塑料离心管中。2．加去离子水溶解后定容至5 ml。3．小份（500 ul/份）分装后于室温保存。4．使用前将25 ul的2-ME加到每小份中。5．加入2-ME的Loading Buffer可在室温下保存一个月左右...
蛋白样品,SDS-PAGE loading buffer,PBS,Tris-Hcl (PH 8.8), Tris-Hcl (PH 6.8) ,30%丙烯酰胺,10%SDS,10%过硫酸,5×SDS-PAGE电泳缓冲液,考马斯亮蓝R-250染色液,脱色液。 实验步骤 一、凝胶配置 1.分离胶的配制 (1)找出配套的胶板,用擦镜纸擦干净,并固定在配胶器上。随后用去离子水试漏; ...
我想说以下几点:1.SDS-PAGE loading buffer一般配成2X 的,5X loading buffer确实过于粘稠,且SDS在低温下难溶于水,这就导致你配的buffer“摇都摇不动”了2.不知你为何要配那么多loading buffer(况且是5X的),这些东西都是用量很少的,建议你少配些,比如……10 ml?3.以下就以2X loading buffer(配制10 ml)为...
配制Takara公司Catalog-N5上的5×SDS-PAGE Loading Buffer。按照配方称量所需试剂于10ml塑料离心管中，溶解后定容至5 ml。小份分装后于室温保存，使用前加入25 ul的2-ME，以延长保存时间。配制1 mol/L DTT溶液，加入20 ml的0.01 M NaOAc (pH5.2)，溶解后使用0.22μm滤器过滤除菌，保存于-20oC...
【配制方法】 0.25ml 量取1.25mL1MTris-HCL(pH6.8),0.5gSDS,25mgBPB,2.5mL 甘油,置于 10mL 塑料离心管中, 加去离子水溶解后,定容至 5mL,小份(0.5mL/份)分装,于室温保存。使用前将 25μL 的 2-ME 加入到 每小份中。加入 2-ME 的 LoadingBuffer 可在室温下保存一个月左右。 【保存条件】 -20℃保...