膜具有与蛋白质高度亲和的能力,因此需要封闭那些未与蛋白质结合的空白位点,防止抗体与膜直接结合,即阻止非特异性结合。常用的封闭剂有脱脂奶粉或BSA(牛血清白蛋白)。 第四步:加抗体 💉 首先加入一抗,一抗可以与蛋白质特异性结合。之后需要洗膜,将未与蛋白质结合的一抗洗掉。然后加入二抗进行检测,二抗是标记了的...
1.5.1 封闭 转膜结束后,把膜先用TBST泡洗两遍再用5%脱脂奶粉(优先推荐)或者BSA室温封闭1-2小时。注意一定要让蛋白面充分接触封闭液。 1.5.2 孵一抗 脱脂奶粉封闭 的话,要用TBST泡洗三遍再转移至一抗溶液中,BSA封闭的可以直接转移至一抗中。如果膜的宽(膜是一个长方形,这里的宽与长相对应)不大于8毫米,...
2、加样、电泳:过稍许时间等胶凝固后把蛋白marker和所需的鉴定的蛋白和标准品蛋白(如BSA)经处理后加到加样孔中,倒入电泳缓冲液接通电源开始跑胶。 3、染色、脱色:等示踪染料溴酚蓝跑至胶末端,关闭电源,去除浓缩胶后,将分离胶放入考马斯亮蓝染色液中染色40分钟,然后放入脱色液中脱色1小时,并换脱色液2-3次。
其中酪蛋白占乳总蛋白含量约80%，酪蛋白主要包含αs 1-酪蛋白、αs 2-酪蛋白、β-酪蛋白和Ƙ-酪蛋白四种蛋白质，分别占总酪蛋白的比例为4:1:4:1，乳清蛋白占乳总蛋白含量约20%，乳清蛋白主要由α-乳白蛋白（Q-LA ）、β-乳球蛋白（B-LG ）、免疫球蛋白（Ig ）和牛血清蛋白（BSA ）组成，分别占总...
R20405-500 通用Buffer Tris-BSA溶液(0.02M,pH=7.0) 500ml R20406-500 通用Buffer Tris-BSA溶液(0.1M,pH=7.0) 500ml C0403-100 通用Buffer Triton Lysis Buffer 100ml C0403-500 通用Buffer Triton Lysis Buffer 500ml R21908-15 通用Buffer Washing/Dilution Buffer 15ml R20613-100 通用Buffer XB盐溶液(20...
用途:BSA 标准品是一种高质量的蛋白定量校准品,广泛用于总蛋白测定实验中来建立标准曲线和校准控 制。BSA 标准品被认可为总蛋白定量的校准蛋白,此标准品可用作 BCA,Bradford 或其他蛋白测定实验中 的蛋白浓度校准标准液。 纯度:99 % 产地:中国/上海
EDTA 乙二胺四乙酸 PAGE 聚丙烯酰胺凝胶电泳 SDS-PAGE SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 SDS是十二烷基硫酸钠 BSA 牛血清清蛋白 CM-C 羧甲基纤维素 DEAE-C 二乙基氨基乙基纤维素 PMSF 苯甲基磺酰氟丝氨酸蛋白酶拟制剂 能力有限!
2、 在加入模板DNA以前可加入少量BSA,减轻管壁对酶的吸附作用。 3、 如果用双酶切,必须注意分别提供各自的最适盐浓度。若两者可以用同种缓冲液,则可同时水解,否则低盐浓度的限制酶必须先用,随着调节盐浓度,再用高盐浓度的限制酶水解。也可在第一个酶切反应完成后,用等体积酚/氯仿(1:1)抽提,加0.1倍体积的...
查得牛血清白蛋白(BSA),分子量为66.446kDa 而实验测得的牛血清白蛋白相对分子量为75.857kDa 相对误差=(|真实值-实验值|/真实值)×100%=14.16% 四、讨论 ①实验分析 1.封水的目的是使分离胶上表面平直,并排除气泡。 凝胶聚合好的标志是胶与水层之间形成清晰的界面。 2.在用注射器加样品时,不可过低以防刺...
5.弃一抗和1%BSA,用0.01M PBS分别洗膜,5min×4次。 6、加入辣根过氧化物酶偶联的二抗(按合适稀释比例用0.01M PBS稀释),平稳摇动,室温2hr。 7、弃二抗,用0.01M PBS洗膜,5min×4次。 8、加入显色液,避光显色至出现条带时放入双蒸水中终止反应。 四、注意事项 1、一抗、二抗的稀释度、作用时间和温度...