根据BSA标准品条带的灰度制作标曲,并计算出目的蛋白的相应浓度。 四、样品要求 浓度大于0.5ug/ul,体积大于50ul, 含盐量不超过20mM 五、项目内容 序号项目明细实验选择方法备注 1还原性-SDS-PAGE检测——上样缓冲液含还原剂 2非原性-SDS-PAGE检测——上样缓冲液含不含还原剂 3还原性-CE-SDS检测关注轻重链、非...
转膜结束后,把膜先用TBST泡洗两遍再用5%脱脂奶粉(优先推荐)或者BSA室温封闭1-2小时。注意一定要让蛋白面充分接触封闭液。 1.5.2 孵一抗 脱脂奶粉封闭 的话,要用TBST泡洗三遍再转移至一抗溶液中,BSA封闭的可以直接转移至一抗中。如果膜的宽(膜是一个长方形,这里的宽与长相对应)不大于8毫米,我习惯置于15毫...
SDS-PAGE,也就是十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳,是一种在蛋白质研究中常用的技术。它的主要目的是分离和检测蛋白质。整个过程可以分为五个主要步骤:电泳、转膜、封闭、加抗体和检测。 第一步:电泳 🚀 在SDS-PAGE中,首先需要制备凝胶。SDS(十二烷基硫酸钠)带负电,能与蛋白质结合,使蛋白质也带上负电。这样,...
根据BSA标准品条带的灰度制作标曲,并计算出目的蛋白的相应浓度。 四、样品要求 浓度大于0.5ug/ul,体积大于50ul, 含盐量不超过20mM 五、项目内容 序号项目明细实验选择方法备注 1还原性-SDS-PAGE检测——上样缓冲液含还原剂 2非原性-SDS-PAGE检测——上样缓冲液含不含还原剂 3还原性-CE-SDS检测关注轻重链、非...
聚丙烯酰胺凝胶电泳(polyacrylamide gelelectrophoresis,PAGE)是以聚丙烯酰胺凝胶作为支持介质的一种电泳方法。聚丙烯酰胺凝胶具有机械强度好,有弹性,透明,化学性质稳定,对pH和温度变化小,没有吸附和电渗作用小的特点,是一种很好的电泳支持介质。 三、实验步骤
EDTA 乙二胺四乙酸 PAGE 聚丙烯酰胺凝胶电泳 SDS-PAGE SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 SDS是十二烷基硫酸钠 BSA 牛血清清蛋白 CM-C 羧甲基纤维素 DEAE-C 二乙基氨基乙基纤维素 PMSF 苯甲基磺酰氟丝氨酸蛋白酶拟制剂 能力有限！TEMED
对于SDS-PAGE,由于在电泳体系中加入了十二烷基硫酸钠(SDS)和强还原剂(如巯基乙醇,二硫苏糖醇等),其中SDS作为阴离子去污剂会破坏蛋白质的氢键和疏水相互作用,导致蛋白质构象改变,而巯基乙醇等可以打开蛋白质分子内的二硫键,使其分解为亚基,因此电泳过程中蛋白质的生物活性丧失或减弱,但电泳后可恢复或部分恢复其活性...
EDTA 乙二胺四乙酸 PAGE 聚丙烯酰胺凝胶电泳 SDS-PAGE SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 SDS是十二烷基硫酸钠 BSA 牛血清清蛋白 CM-C 羧甲基纤维素 DEAE-C 二乙基氨基乙基纤维素 PMSF 苯甲基磺酰氟丝氨酸蛋白酶拟制剂 能力有限!
SDS-PAGE检测蛋白是一种定性的检测方法,图上蛋白条带不能做到精确定量。一般只能通过一些对照样品来比较分析图上蛋白条带的量。比如用已知蛋白量的样品(BSA)和需检测的蛋白样品跑在附近的泳道,通过对比染色后样品的大小,颜色,深浅来估计出需检测蛋白样品的量。
BSA 标准品被认可为总蛋白定量的校准蛋白,此标准品可用作 BCA,Bradford 或其他蛋白测定实验中 的蛋白浓度校准标准液。 纯度: 99 % 产地: 中国/上海 品牌: LMAI Bio 包装规格: 40-60块 货号: LM80047C 是否进口: 否 保质期: 1年 保存条件: -20℃ SDS-PAGE凝胶制备试剂盒 SDS-PAGE kit ...