11、跑胶:上电泳槽夹板时一定要平整,不能一边高低,否则漏液。夹好后加入1*电泳液看看是否漏液,如无漏液,则可用, 12、拔梳子:一定要慢慢的垂直向上用力,不能左右歪。否则把柱子弄歪了,不能上样,这可是有血的教训的。 13、上样:marker在-20冰箱中,如有多块胶,可以把mark放在不同位置,以示区分。上样时...
【实验】SDS-PAGE蛋白凝胶电泳的基本原理,操作方法,注意事项,制胶,上样,跑胶,观察,拍照,蛋白胶,保姆级教程, 视频播放量 63716、弹幕量 147、点赞数 1432、投硬币枚数 524、收藏人数 3077、转发人数 979, 视频作者 植物百科, 作者简介 一个实验型up,偶尔猎奇。,相
1. 首先是配胶问题:为了防止PAGE过早聚合,最好你将配胶的试剂放在4℃条件下。另外,配胶时一定要充分混匀,。 2. 在制分离胶用水压线应该及时(在其聚合前),加水要均匀轻缓不能冲击太大。 3. 点样量不应太大,并且最好不用两边的胶孔,可加入等体积的loading。 4. 跑胶时在浓缩胶阶段最好低电压80V跑0.5...
注意煮后的样本一定记得离心,这个步骤很关键。 2)原因二:胶的问题 条带轻度拖尾、弥散现象,如果样本没有问题,那可以考虑一下胶的问题。参考marker,marker如果也出现拖尾等现象,是否你的胶放置太久(自己配置的超过1周,且保存不当),配胶步骤是否出了问题。 解决办法:换一块新配置的胶试一试。 3)原因三:电压、电...
如果marker正常，而样本条带异常，应检查电压设置、电泳液新鲜度以及电极芯状况，并进行相应调整。以上
1， 提取蛋白的时候要充分超声粉碎，然后高速离心。吸取上清的时候不要触到沉淀。污染不一定是RNA和DNA，还有可能是胶里面有杂质。2. 遇热膨胀过度，你可以在电泳槽里面安放冰槽，电泳液预先降温，同时降低电泳时的电流。还有配琼脂也要用缓冲液，而不是水，不然不导电。 接触不好也会引起条带变形 ...
XAC-伊念创建的收藏夹N课题实验学习内容:【实验】SDS-PAGE蛋白凝胶电泳的基本原理,操作方法,注意事项,制胶,上样,跑胶,观察,拍照,蛋白胶,保姆级教程,如果您对当前收藏夹内容感兴趣点击“收藏”可转入个人收藏夹方便浏览
配胶跑胶注意事项配胶前检查玻璃板是否干净配胶用量杯是否干净准备好试剂,把试剂按顺序摆好,其中聚丙烯酰胺在度冰箱,在冰箱中,提前取出化冻,根据配方准备微升的枪,夹玻璃板,注意
7、两边翘中间凹形条带是什么情况? 原因:凝胶的中间部分凝固不均匀,多出现于较厚的凝胶中。 解决:充分凝固再作后续实验。 8、两边向下中间鼓起形条带什么情况? 原因:两板之间的底部间隙气泡没有排净。 解决:可在两板间加入适量缓冲液。 9、跑出来的胶有很多的横着竖着的条带,这是什么原因?
2、点样：用20µL的小枪头，吸煮过的样品10µL，对准胶孔点样，注意不要把样品点在外面。使用适当的分子量蛋白marker。3、电泳：电泳仪正负极接好，打开电源。浓缩胶：电压 low 100V，分离胶：电压 high 150V。4、卸胶：等胶内的所有的蓝色都跑出去，电泳停止，一般时间为1-2小时左右。把胶板从电泳仪...