3)原因三:电压、电泳液、电极芯等问题 条带轻度拖尾、弥散现象,考虑电压、电泳液、电极芯等问题。参考marker,marker如果没问题,只有样本条带有问题,考虑跑胶的电压是否过高了,电泳液是否是新配置的,点击芯是否出现异常。 解决办法:调整合适电压(一般压缩胶90V,25min左右,分离胶120V适宜;小编实验室野鸡跑法不压胶14...
SDS-PAGE即聚丙烯酰氨凝胶电泳 详细资料如下: 聚丙烯酰胺凝胶电泳是网状结构,具有分子筛效应,它有两种形式,一种是非变性聚丙烯酰胺凝胶,蛋白质在电泳中保持完整的状态,蛋白在其中依三种因素分开:蛋白大小,…
【实验】SDS-PAGE蛋白凝胶电泳的基本原理,操作方法,注意事项,制胶,上样,跑胶,观察,拍照,蛋白胶,保姆级教程, 视频播放量 63716、弹幕量 147、点赞数 1432、投硬币枚数 524、收藏人数 3077、转发人数 979, 视频作者 植物百科, 作者简介 一个实验型up,偶尔猎奇。,相
电泳跑胶SDS-PAGE的定义 SDS-PAGE即聚丙烯酰氨凝胶电泳 详细资料如下: 聚丙烯酰胺凝胶电泳是网状结构,具有分子筛效应,它有两种形式,一种是非变性聚丙烯酰胺凝胶,蛋白质在电泳中保持完整的状态,蛋白在其中依三种因素分开:蛋白大小,形状和电荷。 而SDS-PAGE仅根据蛋白分子量亚基的不同而分离蛋白。这个技术首先是1967年...
在蛋白纯化过程中，SDS-PAGE跑胶的问题对新手来说无疑是一个挑战。我亲身体验过这个“难题”，耗时半学期才逐渐掌握。问题的复杂性主要源于信息的缺乏和自身理解的不足。遇到样本挂孔、条带拖尾和弥散的情况，通常可以从以下几个方面寻找原因：首先，上样浓度问题不容忽视。过高的样本浓度可能导致挂孔，...
14、跑胶:上架,注意黑对黑,红对红,外槽加电泳回收液,加至2gel处即可。上盖,也要注意对上颜色,通电,电压80v把marker跑出来后调电压至120v。跑30-40分钟就差不多了,主要注意跑道下缘位置。 15、下架,切胶:用切角板小心撬开两块玻璃,然后上缘沿分离胶和浓缩胶之间切开,下缘沿marker的最后一条绿线切下,当...
第一:跑出来的胶有很多的横着竖着的条带,不知道是蛋白没有分开还是怎么的.看Bio-Rad上面写的问题分析说可能是蛋白被污染了,所以加了DNAse I和RNase A在最开始的蛋白里面,不过效果还是不好,依然有很多条带.第二:把第一条strip放在成品胶(SDS-PAGE的那个胶)顶部,用琼脂(agarose)凝固了2个小时,然后再跑SDS-...
如何解决SDS-PAGE跑胶问题? 最近一年来只要跑胶就有如图的问题,图是网上搜来的,我的问题和该图一模一样(第6道渗下去的问题),所以就没照相。 望遇到过同样问题并顺利解决的各位不吝指教!我快要疯了,目前实验主要是western,出这种问题非常痛苦!想了很多方法也没有解决。 展开 ...
1， 提取蛋白的时候要充分超声粉碎，然后高速离心。吸取上清的时候不要触到沉淀。污染不一定是RNA和DNA，还有可能是胶里面有杂质。2. 遇热膨胀过度，你可以在电泳槽里面安放冰槽，电泳液预先降温，同时降低电泳时的电流。还有配琼脂也要用缓冲液，而不是水，不然不导电。 接触不好也会引起条带变形 ...
为了装置凝胶花了不少功夫,如果停止电泳太晚就太可惜了。因为如果部分前端的指示剂已经跑出凝胶的话就不能确定各个条带相对应的迁移率了。这块胶有一个内部的刻度——也就是跑胶时带上了分子量标准(Marker)。由于条带较平直,任意条带都可以作为参考来确定跑胶的迁移率。